本文關(guān)鍵詞：谷氨酸在分離的小鼠皮層突觸連接體的釋放

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【摘要】：目的分析興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸在體外分離的小鼠皮層突觸連接體的釋放。方法解剖分離小鼠的大腦皮層,組織經(jīng)勻漿后使用3層147μm的尼龍網(wǎng)篩進(jìn)行過濾,離心后重懸沉淀為突觸連接體。谷氨酸釋放檢測實驗根據(jù)谷氨酸脫氫酶酶促反應(yīng)原理進(jìn)行,利用多功能讀數(shù)儀讀取產(chǎn)物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的熒光值。采用谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,使用制備的突觸連接體進(jìn)行谷氨酸釋放檢測,進(jìn)行3次獨立重復(fù)實驗。結(jié)果谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度與熒光值具有良好的線性關(guān)系。新鮮制備的突觸連接體在加入去極化劑KCl后,釋放谷氨酸顯著增加并逐漸達(dá)到平臺期,加入Triton X-100裂解突觸連接體后釋放谷氨酸明顯增加。凍融1次的突觸連接體失去活性,與新鮮制備的突觸連接體的谷氨酸釋放曲線不同。結(jié)論對小鼠皮層突觸連接體的提取方法進(jìn)行了改良,檢測和分析了興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸在分離制備的小鼠皮層突觸連接體的釋放。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院中心實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 突觸連接體 谷氨酸 釋放 酶促反應(yīng) 小鼠
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81201061) 山西省青年科技研究基金資助項目(2013021036-2) 山西省回國留學(xué)人員科研資助項目(2013-124)
【分類號】：R338
【正文快照】： 神經(jīng)元間的通訊失調(diào)是神經(jīng)系統(tǒng)疾病的重要病理機(jī)制[1,2]。神經(jīng)元間信號傳遞的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是突觸連接,因此突觸結(jié)構(gòu)和功能的改變可引起多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病,例如神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病孤獨癥[3]、神經(jīng)變性疾病阿爾茨海默病等[4]。突觸傳遞的過程包括突觸前膜神經(jīng)遞質(zhì)釋放、突觸間隙神經(jīng)

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本文編號：1036552