本文關鍵詞：PHA誘導的CIK細胞的生物學特性及其對K562細胞殺傷活性影響的研究

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【摘要】：本研究探討植物血凝素(PHA)誘導的細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)與傳統(tǒng)方法制備的CIK細胞的體外增殖能力、效應細胞含量和對K562細胞殺傷活性影響并分析其差異。分離健康人外周血單個核細胞(PBMNC),分甲、乙兩組,其中甲組用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法從PBMNC制備的傳統(tǒng)CIK細胞,乙組采用PHA誘導單個核細胞制備獲得的新型CIK細胞。在培養(yǎng)過程中,每3 d統(tǒng)計各組細胞培養(yǎng)體系中細胞活率和細胞絕對值,并在培養(yǎng)至第15天時,用流式細胞儀分別檢測兩組細胞免疫表型,統(tǒng)計CD3+CD56+、CD3+CD8+和CD3+CD4+細胞占各培養(yǎng)體系總細胞數(shù)的比例;同時用CCK-8試劑盒分別檢測兩組細胞在不同效靶比時對K562細胞的殺傷活性。結果表明:采用PHA誘導制備新型CIK細胞的方法比傳統(tǒng)方法更能促進細胞增殖(P0.05),且細胞活率都保持在90%以上。兩組CD3+CD8+、CD3+CD56+細胞比例都顯著升高。與傳統(tǒng)方法比,新方法的CD3+CD8+細胞升高比例存在顯著差異(P0.05),CD3+CD56+細胞提升比例不存在差異,同時CD3+CD4+下降的比例也不存在差異。效靶比為5∶1、10∶1、20∶1、40∶1時,PHA誘導制備的新型CIK細胞比傳統(tǒng)方法制備的CIK細胞對K562細胞的殺傷活性更強(P0.05),且隨著效靶比的升高兩種效應細胞對K562細胞的殺傷活力的差異明顯性也增加。結論:與傳統(tǒng)方法相比,PHA可明顯提高CIK細胞的增殖能力,調高CD3+CD8+細胞的比例,增強CIK細胞對K562細胞的殺傷活性,這為白血病及其他腫瘤的細胞免疫治療提供一種新來源的CIK細胞和可靠依據(jù)。
【作者單位】： 蘭州大學第二醫(yī)院生物技術轉化醫(yī)學中心;蘭州大學第二醫(yī)院血液科;
【關鍵詞】： 植物血凝素 細胞因子誘導的殺傷細胞 K細胞 殺傷活性
【基金】：科技重大專項計劃(1302FKDA029)
【分類號】：R392
【正文快照】： 植物血凝素(PHA)是T細胞的多克隆活化劑,能促使幼稚淋巴細胞轉化為淋巴母細胞,繼而分裂增殖,釋放淋巴因子,并能提高巨噬細胞的吞噬作用。常規(guī)的細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokine-in-duced killer cells,CIK)是在體外模擬體內生理環(huán)境,人外周血單個核細胞在抗CD3單克隆抗體(McA

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