PHA誘導(dǎo)的CIK細(xì)胞的生物學(xué)特性及其對(duì)K562細(xì)胞殺傷活性影響的研究
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【摘要】:本研究探討植物血凝素(PHA)誘導(dǎo)的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)與傳統(tǒng)方法制備的CIK細(xì)胞的體外增殖能力、效應(yīng)細(xì)胞含量和對(duì)K562細(xì)胞殺傷活性影響并分析其差異。分離健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMNC),分甲、乙兩組,其中甲組用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法從PBMNC制備的傳統(tǒng)CIK細(xì)胞,乙組采用PHA誘導(dǎo)單個(gè)核細(xì)胞制備獲得的新型CIK細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中,每3 d統(tǒng)計(jì)各組細(xì)胞培養(yǎng)體系中細(xì)胞活率和細(xì)胞絕對(duì)值,并在培養(yǎng)至第15天時(shí),用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)兩組細(xì)胞免疫表型,統(tǒng)計(jì)CD3+CD56+、CD3+CD8+和CD3+CD4+細(xì)胞占各培養(yǎng)體系總細(xì)胞數(shù)的比例;同時(shí)用CCK-8試劑盒分別檢測(cè)兩組細(xì)胞在不同效靶比時(shí)對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果表明:采用PHA誘導(dǎo)制備新型CIK細(xì)胞的方法比傳統(tǒng)方法更能促進(jìn)細(xì)胞增殖(P0.05),且細(xì)胞活率都保持在90%以上。兩組CD3+CD8+、CD3+CD56+細(xì)胞比例都顯著升高。與傳統(tǒng)方法比,新方法的CD3+CD8+細(xì)胞升高比例存在顯著差異(P0.05),CD3+CD56+細(xì)胞提升比例不存在差異,同時(shí)CD3+CD4+下降的比例也不存在差異。效靶比為5∶1、10∶1、20∶1、40∶1時(shí),PHA誘導(dǎo)制備的新型CIK細(xì)胞比傳統(tǒng)方法制備的CIK細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活性更強(qiáng)(P0.05),且隨著效靶比的升高兩種效應(yīng)細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活力的差異明顯性也增加。結(jié)論:與傳統(tǒng)方法相比,PHA可明顯提高CIK細(xì)胞的增殖能力,調(diào)高CD3+CD8+細(xì)胞的比例,增強(qiáng)CIK細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活性,這為白血病及其他腫瘤的細(xì)胞免疫治療提供一種新來源的CIK細(xì)胞和可靠依據(jù)。
【作者單位】: 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院生物技術(shù)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心;蘭州大學(xué)第二醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】: 植物血凝素 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞 K細(xì)胞 殺傷活性
【基金】:科技重大專項(xiàng)計(jì)劃(1302FKDA029)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 植物血凝素(PHA)是T細(xì)胞的多克隆活化劑,能促使幼稚淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,繼而分裂增殖,釋放淋巴因子,并能提高巨噬細(xì)胞的吞噬作用。常規(guī)的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine-in-duced killer cells,CIK)是在體外模擬體內(nèi)生理環(huán)境,人外周血單個(gè)核細(xì)胞在抗CD3單克隆抗體(McA
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