ZHX3基因轉(zhuǎn)染BMSCs及對(duì)體外成骨能力的實(shí)驗(yàn)研究
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更多相關(guān)文章: ZHX基因 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨
【摘要】:目的探討轉(zhuǎn)錄抑制因子-鋅指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)基因過(guò)表達(dá)對(duì)BMSCs體外成骨能力的影響。方法采用ZHX3過(guò)表達(dá)慢病毒載體轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,同時(shí)設(shè)空載病毒轉(zhuǎn)染BMSCs作為陰性對(duì)照及不做任何處理的BMSCs做空白對(duì)照。采用熒光顯微鏡計(jì)數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染率,并采用Western blot檢測(cè)ZHX3蛋白表達(dá)狀況。于體外培養(yǎng),經(jīng)定向成骨誘導(dǎo)21d后采用堿性磷酸酶和茜素紅染色觀察各組細(xì)胞成骨能力。結(jié)果 (1)貼壁法獲得的細(xì)胞具有BMSCs表型。(2)轉(zhuǎn)染后,ZHX3過(guò)表達(dá)組和陰性對(duì)照組均表達(dá)綠色熒光,空白對(duì)照組不表達(dá)熒光,且ZHX3過(guò)表達(dá)組ZHX3基因表達(dá)顯著高于陰性對(duì)照組。(3)ZHX3過(guò)表達(dá)、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組均可見(jiàn)堿性磷酸酶陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞。Kaplow評(píng)分顯示前者陽(yáng)性表達(dá)顯著高于后兩者(P0.05)。ZHX3過(guò)表達(dá)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組均可見(jiàn)明顯的礦化結(jié)節(jié)。前者礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量和體積均大于后兩者。結(jié)論 ZHX3基因過(guò)表達(dá)可促進(jìn)BMSCs體外成骨能力。
【作者單位】: 遼寧醫(yī)學(xué)院人體解剖與組織胚胎教研室;
【關(guān)鍵詞】: ZHX基因 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31170930,81202783) 遼寧省教育廳科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)課題(LT2010061)
【分類(lèi)號(hào)】:R341
【正文快照】: 研究表明,轉(zhuǎn)錄抑制因子-鋅指蛋白和同源框3(zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3)是成骨分化的早期標(biāo)志物[1],ZHX3是2003年新克隆的轉(zhuǎn)錄抑制因子,ZHX蛋白家族成員之一,含有兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)和五個(gè)同源結(jié)構(gòu)域,其編碼的蛋白含有837個(gè)氨基酸殘基。ZHX3蛋白可自身形成同源二聚體,也可
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