利用流式細胞術檢測LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬細胞體積的變化
本文關鍵詞:利用流式細胞術檢測LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬細胞體積的變化
【摘要】:目的探討小鼠腹腔巨噬細胞經(jīng)脂多糖(LPS)刺激活化后體積的變化。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬細胞3和24 h后,用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài),用ELISA法檢測細胞上清中IL-6的含量,用流式細胞術定量檢測細胞活化后的體積。結果小鼠腹腔巨噬細胞在正常狀態(tài)下呈圓型,細胞邊緣光滑無偽足,胞質(zhì)內(nèi)無空泡。經(jīng)LPS刺激3 h后,小鼠腹腔巨噬細胞的表面積變大,伸出偽足,偽足的數(shù)量和長度隨時間延長而逐漸增多和增長,胞質(zhì)內(nèi)的空泡也逐漸增加;24 h后,細胞表面積明顯增大,偽足牽拉使細胞形狀呈梭型。LPS處理后細胞上清中IL-6的含量較對照組顯著增加(P0.01)。流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)細胞的前向角散射光(FSC)的數(shù)值(代表細胞大小)隨LPS刺激時間的延長而增加,3和24 h分別增加了11.0%(P0.05)和20.2%(P0.01);側向角散射光(SSC)的數(shù)值(代表表面顆粒數(shù))也逐漸增加,3和24 h分別增加了21.6%(P0.05)和68.0%(P0.01)。結論流式細胞術可以定量檢測小鼠腹腔巨噬細胞經(jīng)LPS活化后的體積變化,為天然免疫細胞的活化研究提供了新的檢測手段。
【作者單位】: 中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所北京協(xié)和醫(yī)學院基礎學院醫(yī)學分子生物學國家重點實驗室;
【關鍵詞】: LPS 巨噬細胞 活化 流式細胞術
【基金】:國家(重點)實驗室專項經(jīng)費(2060204)
【分類號】:R392-33
【正文快照】: 巨噬細胞是重要的天然免疫細胞,具有吞噬清除異物、加工提呈抗原和合成分泌細胞因子等生物學功能,參與維持機體正常的生理和病理狀態(tài)[1]。革蘭氏陰性菌細胞壁成分脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能夠激活巨噬細胞表面Toll樣受體(Toll-like recepter4,TLR4)[2],從而觸發(fā)一系列
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,本文編號:1025063
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