利用流式細(xì)胞術(shù)檢測LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬細(xì)胞體積的變化
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【摘要】:目的探討小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)脂多糖(LPS)刺激活化后體積的變化。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞3和24 h后,用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài),用ELISA法檢測細(xì)胞上清中IL-6的含量,用流式細(xì)胞術(shù)定量檢測細(xì)胞活化后的體積。結(jié)果小鼠腹腔巨噬細(xì)胞在正常狀態(tài)下呈圓型,細(xì)胞邊緣光滑無偽足,胞質(zhì)內(nèi)無空泡。經(jīng)LPS刺激3 h后,小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的表面積變大,伸出偽足,偽足的數(shù)量和長度隨時間延長而逐漸增多和增長,胞質(zhì)內(nèi)的空泡也逐漸增加;24 h后,細(xì)胞表面積明顯增大,偽足牽拉使細(xì)胞形狀呈梭型。LPS處理后細(xì)胞上清中IL-6的含量較對照組顯著增加(P0.01)。流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的前向角散射光(FSC)的數(shù)值(代表細(xì)胞大小)隨LPS刺激時間的延長而增加,3和24 h分別增加了11.0%(P0.05)和20.2%(P0.01);側(cè)向角散射光(SSC)的數(shù)值(代表表面顆粒數(shù))也逐漸增加,3和24 h分別增加了21.6%(P0.05)和68.0%(P0.01)。結(jié)論流式細(xì)胞術(shù)可以定量檢測小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)LPS活化后的體積變化,為天然免疫細(xì)胞的活化研究提供了新的檢測手段。
【作者單位】: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: LPS 巨噬細(xì)胞 活化 流式細(xì)胞術(shù)
【基金】:國家(重點(diǎn))實(shí)驗(yàn)室專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)(2060204)
【分類號】:R392-33
【正文快照】: 巨噬細(xì)胞是重要的天然免疫細(xì)胞,具有吞噬清除異物、加工提呈抗原和合成分泌細(xì)胞因子等生物學(xué)功能,參與維持機(jī)體正常的生理和病理狀態(tài)[1]。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁成分脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能夠激活巨噬細(xì)胞表面Toll樣受體(Toll-like recepter4,TLR4)[2],從而觸發(fā)一系列
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,本文編號:1025063
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