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  本文關(guān)鍵詞：粉塵螨全長cDNA文庫的構(gòu)建及初步鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建粉塵螨全長cDNA文庫,為粉塵螨相關(guān)基因研究奠定基礎(chǔ)。方法用RNAiso Reagent試劑盒提取粉塵螨總RNA,然后以SMART IVTM Oligo-nucleotide和CDSIII/3'PCR Primer為引物,在反轉(zhuǎn)錄酶作用下合成cDNA第1鏈,利用LD-PCR方法合成cDNA第2鏈。合成的雙鏈cDNA經(jīng)蛋白酶K消化及SfiⅠ酶切,得到的cDNA克隆入λTripIEx2載體中,構(gòu)建粉塵螨全長cDNA文庫,測定分析文庫滴度及插入片段大小。結(jié)果成功構(gòu)建粉塵螨全長cDNA文庫。檢測cDNA文庫未擴增時滴度為7.3×106pfu/ml,文庫擴增后滴度為5.0×109pfu/ml,插入片段為0.5~2.5kb,平均1.2kb左右。結(jié)論成功構(gòu)建了高質(zhì)量的粉塵螨全長cDNA表達文庫,所建文庫容量及插入片段大小適用于對粉塵螨相關(guān)基因的進一步研究。
【作者單位】： 鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院;
【關(guān)鍵詞】： 粉塵螨 cDNA文庫 構(gòu)建 鑒定
【基金】：國家自然科學基金項目(No.NS-FC31272369,NS-FC81001330) 江蘇省衛(wèi)生廳招標項目(No.Q201310)
【分類號】：R384.4
【正文快照】： 粉塵螨(Dermatophagoides farinae)隸屬于蜱螨亞綱(55Acari)真螨總目(Acariformes)疥螨目(Sarcoptiformes)甲螨亞目(Oribatida)甲螨總股(Desmonomatides)無氣門股(Astigmatina)羽螨總科(Analgoidea)麥食螨科(Pyroglyphidae)塵螨亞科(Dermatophagoidinae)[1],廣泛存在于人類生

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本文編號：1023661