H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化
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【摘要】:背景:文獻(xiàn)報道間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)體外化學(xué)藥物誘導(dǎo)或自體移植體內(nèi)誘導(dǎo)或模擬心肌樣微環(huán)境體外誘導(dǎo)等方法可不同程度的誘導(dǎo)心肌細(xì)胞分化,但這些方法誘導(dǎo)率低、操作復(fù)雜、毒副作用大。目的:驗證心肌細(xì)胞株H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的誘導(dǎo)作用。方法:運用全骨髓貼壁篩選法分離培養(yǎng)大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞,制備H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液作為誘導(dǎo)培養(yǎng)液,將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)1,3,5,7 d;以單獨10%F12-DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)的H9C2細(xì)胞為陽性對照組;單獨10%F12-DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞為陰性對照組。用免疫熒光法和western-blot檢測其肌鈣蛋白T、心肌細(xì)胞結(jié)蛋白的表達(dá),用實時熒光定量檢測其心肌細(xì)胞特征性基因α-肌球蛋白重鏈和β-肌球蛋白重鏈mRNA的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)7 d,間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化細(xì)胞中肌鈣蛋白T陽性細(xì)胞達(dá)(16±7)%,顯著高于對照組(P0.05);與陰性對照組比較,western-blot檢測誘導(dǎo)培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞后分化細(xì)胞肌鈣蛋白T表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05),結(jié)蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05);RT-PCR檢測分化細(xì)胞α-肌球蛋白重鏈與β-肌球蛋白重鏈mRNA表達(dá)均上調(diào)(P0.05)。結(jié)果提示H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液能誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: 間質(zhì)干細(xì)胞 肌細(xì)胞 心臟 肌鈣蛋白T 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 HC 心肌樣細(xì)胞
【基金】:重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究重點項目(2009-1-51)~~
【分類號】:R329
【正文快照】: 文章亮點:1缺血性心臟病其本質(zhì)是心肌細(xì)胞的不可逆喪失。目前臨床積極進(jìn)行溶栓,介入等再灌注治療,但仍缺乏針對已經(jīng)梗死心肌細(xì)胞再生的根本性治療方法,梗死心肌形成無收縮功能的瘢痕組織,可導(dǎo)致心功能的改變,最終導(dǎo)致心力衰竭。2干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)與再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展為心肌細(xì)胞的再生
【參考文獻(xiàn)】
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2 張衛(wèi)澤;樊艷;陳永清;馬凌;秦勉;哈小琴;韓娟萍;;血管緊張素Ⅱ?qū)Τ扇酥鹃g充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年08期
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,本文編號:1003434
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