發(fā)布時(shí)間：2017-10-09 12:06

  本文關(guān)鍵詞：MUC1 mRNA體外負(fù)載樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞對(duì)非小細(xì)胞肺癌的殺傷作用

  更多相關(guān)文章： 樹突狀細(xì)胞 黏蛋白 電轉(zhuǎn)染 抗腫瘤免疫 肺腫瘤

【摘要】：目的:將體外擴(kuò)增的黏蛋白1(MUC1)mRNA轉(zhuǎn)染入成熟的樹突狀細(xì)胞(DCs),觀察其體外誘導(dǎo)的特異性抗腫瘤效應(yīng)。方法:將分離提純的單核細(xì)胞培養(yǎng)誘導(dǎo)為DC并用流式細(xì)胞術(shù)鑒定。構(gòu)建pcDNA3.1(+)-MUC1質(zhì)粒,體外轉(zhuǎn)錄為mRNA,電穿孔法轉(zhuǎn)染DCs。定量PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染的DCs中MUC1的表達(dá);MTT法檢測(cè)T細(xì)胞增殖情況;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD8+在T細(xì)胞的表達(dá);LDH釋放法測(cè)定細(xì)胞毒性,ELISA檢測(cè)IFN-γ分泌水平。結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明成熟DCs標(biāo)志表型的表達(dá)明顯高于對(duì)照組。定量PCR結(jié)果說明轉(zhuǎn)染后的DCs MUC1 mRNA相對(duì)表達(dá)量增高。轉(zhuǎn)染組DCs與T細(xì)胞按1∶10共培養(yǎng)時(shí),刺激增殖能力明顯高于未轉(zhuǎn)染組,且CD8+T細(xì)胞表達(dá)率高于未轉(zhuǎn)染組,誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性的細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺傷表達(dá)MUC1蛋白的靶細(xì)胞,而未轉(zhuǎn)染組的殺傷作用較弱。轉(zhuǎn)染組DCs與T細(xì)胞共培養(yǎng)的上清中IFN-γ的分泌水平高于未轉(zhuǎn)染組。結(jié)論:電穿孔法可以將MUC1 mRNA成功轉(zhuǎn)染至DCs,產(chǎn)生特異性殺傷效應(yīng),為以MUC1為靶點(diǎn)的非小細(xì)胞肺癌的免疫治療提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院呼吸內(nèi)科;中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院內(nèi)科ICU;
【關(guān)鍵詞】： 樹突狀細(xì)胞 黏蛋白 電轉(zhuǎn)染 抗腫瘤免疫 肺腫瘤
【基金】：廣東省科技計(jì)劃(No.2011B061300009) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81170004) 國(guó)家自然科學(xué)青年基金資助項(xiàng)目(No.81000986)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 肺癌是目前最常見同時(shí)也是死亡率最高的惡性腫瘤[1],其中約86%為非小細(xì)胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)[2]。盡管在腫瘤的全身化療及靶向治療方面取得很大進(jìn)展,但由于肺癌尤其是NSCLC的預(yù)后極差,約半數(shù)病人會(huì)復(fù)發(fā),且對(duì)化療的有效率小于25%,因此迫切需要探索新的治療

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊蕾;癌胚抗原mRNA及SW480細(xì)胞總RNA負(fù)載成熟樹突狀細(xì)胞體外誘導(dǎo)的特異性抗腫瘤作用[D];吉林大學(xué);2009年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Bone marrow-derived dendritic cells pulsed with tumor lysates induce anti-tumor immunity against gastric cancer ex vivo[J];World Journal of Gastroenterology;2008年46期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 常凌愛,路士華,楊莉;樹突狀細(xì)胞在免疫學(xué)中的作用[J];邯鄲醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);1999年01期

2 劉恩梅,羅嘉慧,涂文偉,劉宇隆;胰島素樣生長(zhǎng)因子1誘導(dǎo)臍血CD14~+單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化樹突狀細(xì)胞分化成熟的研究[J];中華兒科雜志;2001年11期

3 劉福生,王忠誠(chéng),歷俊華,林松,任銘,肖慶,張亞卓;腫瘤抗原致敏樹突狀細(xì)胞瘤苗治療顱內(nèi)膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2002年02期

4 劉美娜;樹突狀細(xì)胞與婦科腫瘤生物治療[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè);2002年06期

5 吳軍,王捷,楊太成,賴晃文,鄭文嶺,王曉懷;鈣離子載體對(duì)外周血單核細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2003年01期

6 徐敏,程書榜,王成友,鄭凱;胃癌微環(huán)境中樹突狀細(xì)胞浸潤(rùn)的臨床意義[J];中華胃腸外科雜志;2003年05期

7 楊吉偉;;人外周血樹突狀細(xì)胞體外培養(yǎng)與擴(kuò)增的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).老年醫(yī)學(xué)分冊(cè);2003年02期

8 練詩梅,王曉波,薛祖光,張旗,孫健,荒木弘一;臍血來源樹突狀細(xì)胞的體外誘導(dǎo)及擴(kuò)增[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2004年05期

9 黎陽,包蓉,黃紹良,吳燕峰,魏菁,周敦華;誘導(dǎo)臍血單個(gè)核細(xì)胞分化為樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2004年05期

10 趙岐?jiǎng)?田小俠,張書廣;乙肝疫苗負(fù)載的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)慢性乙型肝炎患者特異性免疫應(yīng)答[J];齊魯醫(yī)學(xué)檢驗(yàn);2004年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉修恒;;小鼠骨髓源性不同成熟度樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)鑒定[A];第十七屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 張慶紅;胡玉珍;呂順艷;鐘延清;;雌激素影響大鼠樹突狀細(xì)胞的分化、成熟和功能[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第六屆全國(guó)青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2003年

3 郭大偉;梁健;姜曉峰;王學(xué)范;魏云濤;姜洪磊;;GPC3基因轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗肝癌HepG2細(xì)胞殺傷作用的研究[A];第十二屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 張新華;鐘翠平;顧云娣;顧曉;范強(qiáng);王國(guó)強(qiáng);周播江;;TGF-β1基因轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞增強(qiáng)移植心臟耐受性并降低Fractalkine的表達(dá)[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

5 于益芝;劉書遜;王文雅;張明徽;郭振紅;徐紅梅;齊潤(rùn)姿;安華章;曹雪濤;;TRAIL在樹突狀細(xì)胞殺傷活化T細(xì)胞中的作用[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

6 尤長(zhǎng)宣;羅榮城;張軍一;蘇瑾;廖旺軍;鄭航;Paul L Hermonat;;基因轉(zhuǎn)移制備樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];第一屆中國(guó)腫瘤靶向治療技術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

7 葛長(zhǎng)勇;李鴻鈞;孫茂盛;馮婷婷;靳昌忠;姚航平;吳南屏;;滅活SV40致敏的猴樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特性研究[A];2008年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 葛長(zhǎng)勇;李鴻鈞;謝天宏;張光明;易山;孫茂盛;吳南屏;;恒河猴樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國(guó)艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國(guó)熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

9 張堯;靳風(fēng)爍;蘭衛(wèi)華;李彥峰;張克勤;吳剛;葉錦;;聯(lián)合應(yīng)用塞萊西布和CpG-ODN對(duì)樹突狀細(xì)胞功能的影響[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 夏強(qiáng);劉衛(wèi)彬;陳振光;張瑩;黃如訓(xùn);;胸腺成熟樹突狀細(xì)胞與重癥肌無力發(fā)生的相關(guān)性分析[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王雪飛;樹突狀細(xì)胞“面目”更清晰[N];健康報(bào);2004年

2 章靜波;干細(xì)胞研究新動(dòng)向[N];健康報(bào);2009年

3 記者 白毅;間充質(zhì)干細(xì)胞可促進(jìn)成熟樹突狀細(xì)胞增殖分化[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

4 方彤;樹突狀細(xì)胞瘤苗新進(jìn)展[N];健康報(bào);2006年

5 本報(bào)記者 沈湫莎;這一次,諾獎(jiǎng)會(huì)不會(huì)頒給逝者[N];文匯報(bào);2011年

6 張獻(xiàn)懷;樹突狀細(xì)胞療法治療惡性黑色素瘤[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

7 記者　毛黎;美發(fā)現(xiàn)一種“超級(jí)”形態(tài)酶[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

8 楊淑娟;美研究出新型丙型肝炎疫苗[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

9 ;慢性HBV感染使樹突狀細(xì)胞功能受損[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

10 章米力;瑞金醫(yī)院乙肝發(fā)病機(jī)制研究獲進(jìn)展[N];健康報(bào);2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 潘建平;γ-干擾素對(duì)樹突狀細(xì)胞分化和功能成熟的調(diào)控及其基因修飾的樹突狀細(xì)胞抗腫瘤免疫機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2002年

2 朱偉國(guó);PPAR-γ激動(dòng)劑吡格列酮抑制血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞免疫激活致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的研究[D];浙江大學(xué);2010年

3 王正昕;腫瘤微環(huán)境中浸潤(rùn)性樹突狀細(xì)胞的表型和免疫學(xué)功能的研究及其臨床意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2000年

4 周向陽;新型熱休克蛋白HSP-DC激活樹突狀細(xì)胞及其佐劑效應(yīng)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 趙鴻;未成熟樹突狀細(xì)胞聯(lián)合骨髓移植誘導(dǎo)大鼠異體腎移植免疫耐受的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

6 陳玉丙;樹突狀細(xì)胞抗原負(fù)載及MAGE-3 DNA瘤苗研制[D];吉林大學(xué);2004年

7 王宏偉;肺間質(zhì)樹突狀細(xì)胞在多器官功能障礙綜合征中的免疫激活與免疫耐受作用研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

8 趙毅;青藤堿對(duì)RA患者樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響及機(jī)制研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 劉海波;Fas信號(hào)激活樹突狀細(xì)胞炎性復(fù)合體形成的生物學(xué)意義與分子機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

10 趙娟;受者來源的PIR-B轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞對(duì)小鼠異基因骨髓移植GVHD的保護(hù)作用[D];華中科技大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳鳴宇;黑色素瘤基因（MAGE-1）相關(guān)肽負(fù)載樹突狀細(xì)胞對(duì)肝癌細(xì)胞殺傷作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2003年

2 孟冬梅;急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及功能研究[D];青島大學(xué);2003年

3 梁軍利;IFN-β1a對(duì)多發(fā)性硬化樹突狀細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

4 黃祺琦;耐受性樹突狀細(xì)胞來源的exosome治療小鼠免疫介導(dǎo)性再生障礙性貧血的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2010年

5 初曉霞;淋巴瘤樹突狀細(xì)胞的表達(dá)與臨床分期、惡性度及預(yù)后的相關(guān)性研究[D];青島大學(xué);2002年

6 劉麗燕;MyD88在OK-432誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟中的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

7 郭佳;TLR配體誘導(dǎo)骨髓來源樹突狀細(xì)胞獲得產(chǎn)生全反式維甲酸的能力[D];浙江大學(xué);2011年

8 才志剛;凍融抗原沖擊致敏的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生肺癌特異性免疫應(yīng)答的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

9 李靜;癌—睪丸抗原OY-TES-1致敏樹突狀細(xì)胞的體外抗肝癌研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 吳軍;樹突狀細(xì)胞（DC）的培養(yǎng)及CEA-重組痘苗病毒轉(zhuǎn)染DC誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞免疫[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

，

本文編號(hào)：1000090