本文關(guān)鍵詞：肺炎支原體鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白基因的克隆表達(dá)與純化

  更多相關(guān)文章： 肺炎支原體 Fur蛋白 克隆 表達(dá)

【摘要】：[目的]克隆肺炎支原體鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白(Fur)基因并純化Fur蛋白,為研究其生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)。[方法]利用Clustal Omega分析肺炎支原體Fur蛋白及其同源序列并用MEGA6.0構(gòu)建進(jìn)化樹,通過PCR擴(kuò)增Fur基因并對其進(jìn)行雙酶切,然后連接到p ET28a,得到重組載體p ET28a-Fur,將其轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),利用IPTG誘導(dǎo)Fur蛋白表達(dá),并通過親和層析純化Fur蛋白。[結(jié)果]多序列比對和進(jìn)化樹分析表明Mp含有一個(gè)Fur蛋白�？寺〉玫酱笮�477 bp的Fur基因,編碼159個(gè)氨基酸。得到重組表達(dá)質(zhì)粒p ET28a-Fur,該質(zhì)粒能在大腸桿菌中能高效表達(dá),并純化得到重組Fur蛋白。[結(jié)論]成功克隆獲得Mp Fur基因,在大腸桿菌中高效表達(dá)并獲得高純度Fur蛋白。
【作者單位】： 邵陽醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校;南華大學(xué)病原生物學(xué)研究所特殊病原體防控湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 肺炎支原體 Fur蛋白 克隆 表達(dá)
【基金】：湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(“次抑菌濃度的大環(huán)內(nèi)酯藥物誘導(dǎo)Mp交叉耐藥的機(jī)制研究”;No.2013FJ3067) 特殊病原體防控湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室資助項(xiàng)目(湘科計(jì)字[2014]10號(hào))
【分類號(hào)】：R378;Q78
【正文快照】： 鐵是細(xì)菌在生存和生長過程中必需的金屬元素之一,它參與了細(xì)菌的電子傳遞、DNA合成和氧的運(yùn)輸?shù)雀鞣N生理和生化過程[1]。但是細(xì)菌胞內(nèi)高濃度的鐵離子會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)的氧化失衡,細(xì)菌必須具備一定機(jī)制用來維持細(xì)菌體內(nèi)的鐵離子平衡[1-2]。鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白(ferric uptake regulator

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 宋志強(qiáng);李媛;孫文靜;劉洋;鄒曉輝;陳維;周玉梅;辛九慶;;牛支原體新基因(P18)的克隆表達(dá)及活性鑒定[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2012年03期

2 糜祖煌,秦玲;支原體科病原體分子檢測方法學(xué)研究[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2002年02期

3 王瑋蓁,孔繁榮,朱學(xué)駿,陳洪,周向昭;蛋白表達(dá)在支原體研究中的應(yīng)用[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;1999年04期

4 駱丹;與艾滋病相關(guān)的支原體的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(皮膚性病學(xué)分冊);1998年02期

5 王保寧,寧磊;蘭州地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺支原體感染調(diào)查和分離鑒定[J];中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2001年04期

6 ;[J];;年期

，

本文編號(hào)：999733