FTA-巢式PCR方法鑒定溶組織內(nèi)阿米巴原蟲的初步研究
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【摘要】:目的建立一種簡便、快速的FTA-巢式PCR方法用于鑒定糞便中溶組織內(nèi)阿米巴原蟲(Entamoeba histolytica,E.h)。方法收集門診腹瀉病人新鮮糞便,用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行初步檢查。用FTA卡抽提鏡檢結(jié)果為陽性的糞便DNA,根據(jù)溶組織內(nèi)阿米巴原蟲的SSU-rRNA序列設(shè)計引物,進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增,對PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠分析,并對陽性產(chǎn)物進(jìn)行測序和序列比對分析。結(jié)果根據(jù)光學(xué)顯微鏡檢測結(jié)果,挑選了44例鏡檢結(jié)果為阿米巴原蟲陽性的腹瀉病人糞便。經(jīng)FTA-巢式PCR擴(kuò)增,其中20例樣本可擴(kuò)增出427bp左右的目的條帶,目的條帶的測序和序列分析結(jié)果表明為溶組織內(nèi)阿米巴原蟲。鏡檢方法與巢式PCR方法的陽性符合率為45.45%(20/44),將E.h與形態(tài)學(xué)相似的其他內(nèi)阿米巴原蟲進(jìn)行了鑒定和區(qū)分。結(jié)論本研究建立的FTA-巢式PCR方法具有簡單、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點,為臨床檢驗和流行病學(xué)調(diào)查中E.h的鑒別診斷提供了新的技術(shù)方法。
【作者單位】: 中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所衛(wèi)生部寄生蟲病原與媒介生物學(xué)重點實驗室世界衛(wèi)生組織瘧疾血吸蟲病和絲蟲病合作中心;
【關(guān)鍵詞】: 溶組織內(nèi)阿米巴 FTA 巢式PCR 鑒定
【基金】:衛(wèi)生行業(yè)科研專項(No.201202019) 國家科技重大專項(No.2012ZX10004-220)聯(lián)合資助~~
【分類號】:R382.1
【正文快照】: 衛(wèi)生行業(yè)科研專項(No.201202019)和國家科技重大專項(No.2012ZX10004-220)聯(lián)合資助阿米巴腸病是由于溶組織阿米巴(Entamoebahistolytica,E.h)寄生于結(jié)腸內(nèi),引起阿米巴痢疾或阿米巴結(jié)腸炎一種人獸共患寄生蟲病[1]。該病分布范圍廣,易感機(jī)體較多,呈世界性流行傳播。全球每年約有
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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,本文編號:997969
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