本文關(guān)鍵詞：HSPA12B在抑制LPS所致內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)中的必要性研究

  更多相關(guān)文章： HSPA12B 內(nèi)毒素 HUVEC 炎癥反應(yīng)

【摘要】：背景和目的:熱休克蛋白是一類基因序列高度保守的蛋白質(zhì),它對于細胞的氧化應(yīng)激和凋亡都具有保護作用。熱休克蛋白A12B(Heat shock protein A12B,HSPA12B)是新近發(fā)現(xiàn)的HSP70家族的新成員,主要表達于血管內(nèi)皮細胞。前期研究中我們發(fā)現(xiàn),高表達HSPA12B可顯著改善細菌內(nèi)毒素(lipopolysaccharide,LPS)所致的心功能損害,其機制可能與抑制心肌細胞的炎癥反應(yīng)有關(guān)。本研究旨在探討HSPA12B對LPS所致人血管內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)的影響。方法:1.western blot方法檢測LPS刺激HUVEC不同時間點HSPA12B的表達量2.si RNA敲降HUVEC中HSPA12B的表達(1)通過RT-PCR在m RNA水平驗證HSPA12B敲降效率(2)通過western blot在蛋白水平驗證HSPA12B敲降效率3.檢測HUVEC在LPS刺激后的炎癥反應(yīng)(1)RT-PCR技術(shù)檢測TNF-α、IL-6、VCAM-1及ICAM-1的表達量(2)ELISA方法檢測TNF-α和IL-6從細胞的釋放情況(3)黏附反應(yīng)觀察LPS對“PMN-HUVEC”黏附的影響4.檢測HSPA12B敲降對LPS誘導的HUVEC炎癥反應(yīng)的影響(1)RT-PCR技術(shù)檢測低表達HSPA12B的HUVEC中TNF-α、IL-6、VCAM-1及ICAM-1的表達量(2)黏附反應(yīng)觀察低表達HSPA12B的HUVEC細胞模型中HUVEC對PMN黏附率的變化結(jié)果:1.LPS刺激后HSPA12B表達呈現(xiàn)快速上升趨勢2.si RNA轉(zhuǎn)染使HUVEC中HSPA12B的m RNA水平和蛋白水平顯著降低,提示HSPA12B敲降(knockdown)的HUVEC細胞模型構(gòu)建成功。3.LPS刺激后,HUVEC中TNF-α、IL-6、VCAM-1及ICAM-1的m RNA水平較對照組均顯著增加,培養(yǎng)上清中TNF-α和IL-6的釋放量較對照組顯著增加,HUVEC-PMN黏附率較對照組顯著增加,提示HUVEC中炎癥反應(yīng)在LPS刺激后被顯著激活。4.HSPA12B敲降后,進一步升高LPS所誘導的TNF-α、IL-6、VCAM-1及ICAM-1在m RNA水平、以及PMN-HUVEC的黏附。結(jié)論:本研究表明,HSPA12B是抑制LPS所致炎癥反應(yīng)所必須的。
【關(guān)鍵詞】：HSPA12B 內(nèi)毒素 HUVEC 炎癥反應(yīng)
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R364.5
【目錄】：

• 英文縮寫和略語5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-13
• 參考文獻11-13
• 第一部分 LPS對HUVEC中HSPA12B表達的影響13-22
• 材料與方法13-19
• 結(jié)果19-20
• 討論20-21
• 參考文獻21-22
• 第二部分 LPS可誘導HUVEC發(fā)生炎癥反應(yīng)22-31
• 材料和方法22-27
• 結(jié)果27-29
• 討論29-30
• 參考文獻30-31
• 第三部分 siRNA敲降HUVEC中HSPA12B表達31-43
• 材料與方法31-39
• 結(jié)果39-40
• 討論40-41
• 參考文獻41-43
• 第四部分 HSPA12B敲降加重LPS所致的HUVEC炎癥 反應(yīng)43-48
• 材料和方法43-44
• 結(jié)果44-45
• 討論45-46
• 參考文獻46-48
• 綜述48-58
• 參考文獻53-58
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況58-59
• 致謝59

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1 ;我國科學家發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體炎癥反應(yīng)新機制[J];中國科技產(chǎn)業(yè);2007年08期

2 ;健康老人抑郁癥狀與炎癥反應(yīng)相關(guān)[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;2010年04期

3 唐宏;;炎癥反應(yīng) 中國科學家談科學[J];科學觀察;2009年04期

4 張熒熒;李淵越;韓家淮;;炎癥反應(yīng),健康衛(wèi)士還是癌癥幫兇?[J];中國基礎(chǔ)科學;2012年02期

5 ;發(fā)展炎癥反應(yīng)概念——哺乳動物抗菌肽及其基因表達調(diào)控研究[J];中國病理生理雜志;2001年08期

6 段金成;丁志峰;和紅兵;;炎癥反應(yīng)介質(zhì)對炎癥影響機制的探討[J];昆明醫(yī)學院學報;2009年S2期

7 彭代智;;燒傷后炎癥反應(yīng)的病因、分子機制及防治對策[J];中華燒傷雜志;2005年06期

8 李成龍;屠偉峰;;炎癥反應(yīng)在胃黏膜防御中的作用[J];實用醫(yī)學雜志;2008年03期

9 趙紅梅;阮海華;;不同鹽離子對單核細胞炎癥反應(yīng)的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2011年10期

10 吳錦鴻;許國根;徐芝君;徐遠勝;顧清;;全身炎癥反應(yīng)綜合征患者血小板活化與炎癥反應(yīng)的相關(guān)性研究[J];全科醫(yī)學臨床與教育;2011年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜勇;;炎癥反應(yīng)的研究現(xiàn)狀與未來[A];中國病理生理學會受體、腫瘤和免疫專業(yè)委員會聯(lián)合學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 歐陽文;何慧娟;王意;;圍術(shù)期炎癥反應(yīng)與術(shù)后認知功能障礙(英文)[A];中華醫(yī)學會第二十次全國麻醉學術(shù)年會論文匯編[C];2012年

3 張衛(wèi)茹;侯凡凡;劉尚喜;郭志堅;周展眉;;晚期糖基化終產(chǎn)物增加動脈粥樣硬化部位的炎癥反應(yīng)[A];“中華醫(yī)學會腎臟病學分會2004年年會”暨“第二屆全國中青年腎臟病學術(shù)會議”論文匯編[C];2004年

4 濮紅梅;尹忠誠;劉秉成;李勝開;馮錦紅;;血液透析患者血清IL-10與炎癥反應(yīng)及營養(yǎng)狀況的關(guān)系研究[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術(shù)年會論文集[C];2006年

5 陸志偉;黃慧;姜純國;徐作軍;;輔助性T淋巴細胞與特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化關(guān)系的初步研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

6 俞佳;王仲;;內(nèi)源性氣體信號分子硫化氫與炎癥反應(yīng)[A];中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會第十三次全國急診醫(yī)學學術(shù)年會大會論文集[C];2010年

7 周曉艷;徐營營;謝兆宏;許繼平;畢建忠;;炎癥反應(yīng)與神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病的研究進展[A];2011全國老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學術(shù)會議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

8 張會云;崔克亮;曹書華;;炎癥反應(yīng),凝血機制與MODS的發(fā)病機理的關(guān)系[A];中華醫(yī)學會急診分會第五屆全國危重病學術(shù)交流會論文匯編[C];2004年

9 燕艷麗;邱海波;楊毅;許紅陽;王麗;孫輝明;;急性呼吸窘迫綜合征家兔肺部及肺外器官炎癥反應(yīng)的變化[A];第六屆全國危重病學術(shù)交流大會論文匯編[C];2005年

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中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊一唯邋記者 王春;我科學家發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體炎癥反應(yīng)新機制[N];科技日報;2007年

2 王蔚;我國科學家發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體炎癥反應(yīng)新機制[N];大眾科技報;2007年

3 記者 徐瑞哲;第三者“插足”抑制炎癥反應(yīng)[N];解放日報;2007年

4 記者白毅;炎癥反應(yīng)中淋巴結(jié)重塑新機制被揭示[N];中國醫(yī)藥報;2011年

5 記者 耿挺;尋找炎癥反應(yīng)蛋白[N];上�？萍紙�;2007年

6 信文;“IL-10”蛋白調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

7 知陶;把炎癥反應(yīng)排除在外[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

8 韓秀霞;Capase-12蛋白參與炎癥反應(yīng)[N];中國醫(yī)藥報;2005年

9 范曉艷;免疫系統(tǒng)“出錯” 救星變?yōu)男荹N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

10 高春東;軟組織挫傷用抗生素無效[N];大眾衛(wèi)生報;2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 段二珍;HMGB1在PRRSV感染中的作用及Glycyrrhizin抗PRRSV活性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2014年

2 韋超;GIT2抑制TLR介導的炎癥反應(yīng)[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

3 楊瀟;草魚白細胞介素1β誘導表達的負調(diào)控機制及其在炎癥反應(yīng)中的意義[D];電子科技大學;2014年

4 李吉林;Toll-like receptor2/4在冠狀動脈內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)調(diào)控中的作用[D];南方醫(yī)科大學;2011年

5 柳楠;腸道病毒分子流行病學及腸道病毒71型感染致炎癥反應(yīng)機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2014年

6 溫雅;旋覆花內(nèi)酯通過調(diào)制miR-155介導的炎癥反應(yīng)對缺血性腦組織發(fā)揮保護作用[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 徐佳;HMGB1內(nèi)化介導的晚期炎癥反應(yīng)的分子機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

8 楊朝暉;糖皮質(zhì)激素誘導的亮氨酸拉鏈蛋白在炎癥反應(yīng)中作用的初步研究[D];華中科技大學;2009年

9 鄧婷婷;Toll樣受體信號與Gas6/ProS-TAM系統(tǒng)在調(diào)節(jié)小鼠巨噬細胞炎癥反應(yīng)中的功能[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2012年

10 潘禮龍;硫化氫及炔丙基半胱氨酸抗心血管炎癥反應(yīng)研究[D];復旦大學;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 要萌萌;Mdx小鼠骨骼肌中炎癥反應(yīng)和mpeg1的表達[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 張曉瑩;去鐵胺對脂多糖誘發(fā)的小鼠中樞神經(jīng)炎癥反應(yīng)與記憶損傷的改善作用[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

3 陳凱;纈沙坦對糖尿病大鼠腎臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎癥反應(yīng)的抑制作用[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

4 張凱;MiR-322負調(diào)控LPS誘導炎癥反應(yīng)的機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

5 李雪寒;HSPA12B在抑制LPS所致內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)中的必要性研究[D];南京醫(yī)科大學;2015年

6 徐士欣;活化血小板在急性缺血性腦卒中后炎癥反應(yīng)中作用機制的研究[D];天津醫(yī)科大學;2007年

7 劉宏;線粒體DNA編碼蛋白質(zhì)在炎癥反應(yīng)中作用的初步探討[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2013年

8 王瑞偉;術(shù)后認知功能障礙（POCD）的炎癥反應(yīng)機制研究進展[D];山東大學;2012年

9 亢翠翠;SIRS患者外周血中Th17的變化特點及其對炎癥反應(yīng)的影響[D];泰山醫(yī)學院;2011年

10 李榜龍;探討抗氧化劑對人血管內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)的干預作用[D];南華大學;2010年

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本文編號：984608