本文關(guān)鍵詞：免疫磁珠分選法原代培養(yǎng)小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

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【摘要】：目的:探討一種高效、穩(wěn)定的小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞(PMVECs)原代培養(yǎng)方法。方法:選取45只1周齡Balb/c小鼠,隨機分成3組,分別用酶消化法、組織貼塊法、免疫磁珠分選法3種方法分離培養(yǎng)小鼠PMVECs,觀察細胞形態(tài)學(xué)以及VIII因子相關(guān)抗原免疫熒光染色鑒定內(nèi)皮細胞,計算各組原代培養(yǎng)成功率及從原代培養(yǎng)開始到首次傳代所需時間,測定細胞純度,MTT法繪制生長曲線。結(jié)果:3組原代培養(yǎng)的細胞在倒置顯微鏡下均能見到短梭形、多邊形的微血管內(nèi)皮細胞,血管內(nèi)皮細胞特異性標志物VIII因子相關(guān)抗原表達陽性。免疫磁珠分選法組原代培養(yǎng)成功率及細胞活性顯著高于其他2組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),從原代培養(yǎng)至首次傳代所需的時間短于組織貼塊法組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),細胞純度顯著高于酶消化法組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:相比于酶消化法與組織貼塊法,免疫磁珠分選法原代培養(yǎng)小鼠PMVECs具有重復(fù)性好,分離速度快,細胞純度高及活性好的優(yōu)點。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科;
【關(guān)鍵詞】： 細胞培養(yǎng) 原代培養(yǎng) 免疫磁珠 肺微血管內(nèi)皮細胞
【基金】：浙江省自然科學(xué)基金資助項目(LY12H01001)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 建立高效的肺微血管內(nèi)皮細胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)體外培養(yǎng)方法對急性肺損傷等疾病發(fā)病機制及藥物治療等方面的研究起著重要作用。目前文獻報道體外培養(yǎng)PMVECs的方法主要有酶消化法、組織塊培養(yǎng)法、免疫磁珠分選法,但由于PMVECs較脆弱難成活、

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