過表達(dá)IGF-1對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞氧化損傷的抑制作用
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【摘要】:目的:分析過表達(dá)胰島素樣生長因子1(IGF-1)對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)氧化損傷的抑制作用,開發(fā)UC-MSCs新的應(yīng)用模式。方法:通過酶消化法,從臍帶組織中分離UC-MSCs,并采用流式細(xì)胞術(shù)對細(xì)胞的表面特異標(biāo)志物進(jìn)行鑒定,通過逆轉(zhuǎn)錄病毒感染體系,構(gòu)建過表達(dá)IGF-1的UC-MSCs(UC-MSCs-IGF-1),并進(jìn)一步通過實(shí)時熒光定量PCR和流式細(xì)胞術(shù)對UC-MSCs-IGF-1的IGF-1表達(dá)水平進(jìn)行評價,同時分析UC-MSCs-IGF-1的表面標(biāo)志物及成骨成脂分化能力;用不同濃度的H_2O_2(0μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)處理細(xì)胞,分析UC-MSCs-IGF-1在增殖活力維持、抗氧化損傷和抗凋亡方面的優(yōu)勢。結(jié)果:UC-MSCs表面標(biāo)志物CD29、CD90和CD105的表達(dá)均呈陽性,而CD34的表達(dá)為陰性,符合正常間充質(zhì)干細(xì)胞的表型特征;實(shí)時熒光定量PCR和流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒感染體系構(gòu)建的UC-MSCs-IGF-1在IGF-1表達(dá)方面遠(yuǎn)高于正常UC-MSCs,同時干細(xì)胞表型與UC-MSCs一致,且具備正常的成脂成骨分化能力;在H_2O_2的氧化損傷作用下,與UC-MSCs相比,UC-MSCs-IGF-1具有較強(qiáng)的增殖活力和抗氧化、抗凋亡功能,同時細(xì)胞中的SOD活性略高于UC-MSCs。結(jié)論:過表達(dá)IGF-1對UC-MSCs的氧化損傷及氧化引起的凋亡均具有一定的防護(hù)作用,與正常UC-MSCs相比,UC-MSCsIGF-1可能在臨床應(yīng)用方面具有一定的優(yōu)勢。
【作者單位】: 暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 深圳市人民醫(yī)院麻醉科;暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 深圳市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;中山大學(xué)人類病毒學(xué)研究所;吉林大學(xué)藥學(xué)院再生醫(yī)學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】: 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 胰島素樣生長因子 氧化損傷 細(xì)胞凋亡
【基金】:深圳市知識創(chuàng)新計劃(No.JCYJ20140416122812052) 吉林大學(xué)研究生創(chuàng)新基金資助項目(No.2015009) 深圳市衛(wèi)生計生系統(tǒng)科研項目(No.201401010)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 近年來,以干細(xì)胞特別是成體干細(xì)胞為基礎(chǔ)的新型治療模式,已在多種疾病的治療上進(jìn)行了深入研究[1-4]。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesen-chymal stem cells,UC-MSCs)具有多向分化潛能,還能夠遷移至受損組織處,通過分泌營養(yǎng)因子促進(jìn)損傷組織修復(fù),在體內(nèi)發(fā)揮功能的過程中未
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本文編號:977748
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