A型流感病毒血凝素蛋白S-棕櫚酰化修飾的質(zhì)譜分析
發(fā)布時間:2017-10-05 12:07
本文關(guān)鍵詞:A型流感病毒血凝素蛋白S-棕櫚;揎椀馁|(zhì)譜分析
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【摘要】:蛋白質(zhì)S-棕櫚酰化修飾是指棕櫚酸分子通過硫酯鍵共價結(jié)合在蛋白質(zhì)分子的半胱氨酸(S)的巰基側(cè)鏈上,是蛋白質(zhì)脂類修飾的重要形式之一,在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝等過程中起著重要作用。本實驗首先利用酰基-生物素置換反應(yīng),將A型流感病毒血凝素蛋白上的S-棕櫚酸分子轉(zhuǎn)換為含有生物素(Biotin)分子的標(biāo)簽。生物素標(biāo)記蛋白經(jīng)特異性富集、電泳分離純化后,進(jìn)行膠內(nèi)水解。再利用質(zhì)譜技術(shù)對水解混合物進(jìn)行分析。結(jié)果表明,經(jīng);-生物素置換方法處理A型流感病毒裂解產(chǎn)物后,蛋白質(zhì)耦聯(lián)生物素的濃度(羥胺處理,+Hydroxylamine)與空白對照組(未加羥胺處理,-Hydroxylamine)的比值大于3;對經(jīng)富集后的流感病毒血凝素蛋白進(jìn)行了質(zhì)譜分析,鑒定了A型的兩個S-棕櫚酰化修飾位點,分別位于蛋白羧基末端的Cys_(562)和Cys_(565)。本研究為大規(guī)模研究S-棕櫚酰化修飾蛋白提供了一種特異、有效的分析方法。
【作者單位】: 吉林大學(xué)第二醫(yī)院;吉林大學(xué)人獸共患病研究所人獸共患病研究教育部重點實驗室;吉林省疾病預(yù)防與控制中心;
【關(guān)鍵詞】: 流感病毒 血凝素蛋白 ;-生物素置換 S-棕櫚;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(Nos.21175055,81673168,31372409) 吉林省科技廳項目(Nos.20110739,20150204001YY) 吉林大學(xué)白求恩計劃B(No.2012210) 吉林省衛(wèi)生計生委(No.2015Z041)資助項目~~
【分類號】:R373;O657.63
【正文快照】: 2(吉林大學(xué)人獸共患病研究所,人獸共患病研究教育部重點實驗室,長春130062)3(吉林省疾病預(yù)防與控制中心,長春130041)本文系國家自然科學(xué)基金(Nos.21175055,81673168,31372409)、吉林省科技廳項目(Nos.20110739,20150204001YY)、吉林大學(xué)白求恩計劃B(No.2012210)、吉林省衛(wèi)生計
【相似文獻(xiàn)】
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 高祥;流感病毒與宿主細(xì)胞相互作用的棕櫚酰化蛋白的分析與鑒定[D];吉林大學(xué);2016年
2 張玉靈;蛋白質(zhì)棕櫚;{(diào)控擬南芥根毛極性生長的機(jī)理研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
,本文編號:976694
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