本文關(guān)鍵詞：一種骨髓單個(gè)核細(xì)胞新型示蹤方法——細(xì)胞膜染料DiD標(biāo)記法

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【摘要】：目的檢測細(xì)胞膜染料DiD對(duì)骨髓單個(gè)核細(xì)胞(bone marrow mononuclear cells,BM-MNC)的染色效率和造血功能的影響,并用DiD示蹤BM-MNC活體直觀觀察DiD標(biāo)記的BM-MNC在小鼠顱骨骨髓內(nèi)的順利歸巢。方法體外流式細(xì)胞術(shù)分析方法和激光共聚焦掃描顯微鏡成像方法檢測BM-MNC的DiD染色效率;CCK-8細(xì)胞活性-增殖實(shí)驗(yàn)和造血集落形成實(shí)驗(yàn),檢測DiD染料對(duì)BM-MNC的造血功能的影響;單/雙光子共聚焦顯微鏡下活體直觀觀察DiD標(biāo)記的BM-MNC在小鼠顱骨骨髓內(nèi)的歸巢。結(jié)果 BM-MNC的DiD染色效率高達(dá)90%以上,且DiD對(duì)BM-MNC的細(xì)胞活性-增殖和造血能力均無明顯的毒性影響(P0.05);單/雙光子共聚焦顯微鏡下,在活體小鼠顱骨骨髓內(nèi)可直觀觀察到DiD標(biāo)記的BM-MNC的順利歸巢。結(jié)論細(xì)胞膜染料DiD對(duì)BM-MNC的染色效率高、均一,無明顯細(xì)胞毒性,熒光不易被淬滅,且受機(jī)體自身組織的背景干擾少,用于活體示蹤時(shí)DiD標(biāo)記的BM-MNC可順利歸巢到骨髓。
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院血液科;上海交通大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院Med-X研究院;
【關(guān)鍵詞】： 細(xì)胞膜染料 骨髓單個(gè)核細(xì)胞 造血干細(xì)胞移植
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81561138002,91542109) 上海市基礎(chǔ)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(13JC1406404) 上海市優(yōu)秀學(xué)術(shù)帶頭人計(jì)劃(16XD1400600)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 骨髓單個(gè)核細(xì)胞(bone marrow mononuclearcell,BM-MNC)作為造血干細(xì)胞(hematopoieticstem cell,HSC)的主要來源之一,具有多種臨床治療潛能,且短時(shí)間易獲取、不需要體外培養(yǎng),目前已成功應(yīng)用于臨床上的造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)[1-4]。BM-M

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：962810