本文關(guān)鍵詞：多巴胺經(jīng)D2類受體抑制脂多糖誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)

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【摘要】：目的探索多巴胺及多巴胺受體在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞相關(guān)炎癥中的作用及機(jī)制。方法1腹腔注射巰基乙酸鹽肉湯后四天后,獲取C57野生型(TLR4~(+/+))小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞進(jìn)行研究,多巴胺分別以不同濃度(10~(-6),10~(-5),10~(-4) mol/L)和時(shí)間(0.5,1,2 h)預(yù)處理小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞后,1μg/ml LPS作用細(xì)胞6 h。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF-α濃度,Western-blot檢測TLR4、pro-IL-1β的表達(dá),CCK8檢測細(xì)胞活力,篩選多巴胺抑炎的最佳濃度和時(shí)間。2小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞按如下分組處理:對照組(正常培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)、LPS刺激組(1μg/ml LPS刺激6 h)、多巴預(yù)處理組(多巴胺預(yù)處理后1μg/ml LPS刺激6h)、多巴胺受體拮抗劑組(多巴胺D1類或D2類受體拮抗劑預(yù)處理后,再加入多巴胺及LPS)、多巴受體激動(dòng)劑組(多巴D1類受體或D2類受體激動(dòng)劑預(yù)處理后加入LPS)。運(yùn)用ELISA檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF-α濃度,Western-blot檢測TLR4、pro-IL-1β的表達(dá)。3原代培養(yǎng)野生型(TLR4~(+/+))和TLR4基因缺失(TLR4~(-/-))小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,分別按如下分組處理:對照組(正常培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)、lps刺激組(1μg/mllps刺激6h)、多巴胺預(yù)處理組(多巴胺預(yù)處理后1μg/mllps刺激6h)。運(yùn)用elisa檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中tnf-α濃度,western-blot檢測tlr4、pro-il-1β的表達(dá)。結(jié)果1elisa和western-blot結(jié)果顯示,與lps刺激組相比,10-4mol/l多巴胺預(yù)處理小鼠腹腔巨噬細(xì)胞2h能夠有效抑制lps誘導(dǎo)的tnf-α、tlr4、pro-il-1β表達(dá)(p0.05),cck-8結(jié)果顯示各組細(xì)胞活力無差異(p0.05)。2與多巴預(yù)處理組相比,多巴胺d2類受體拮抗劑可減弱多巴胺對lps誘導(dǎo)的tnf-α、tlr4、pro-il-1β表達(dá)的抑制作用(p0.05),而多巴胺d1類受體拮抗劑則無此作用;相反,與lps刺激組相比,多巴胺d2類受體激動(dòng)劑抑制了tnf-α的表達(dá)(p0.05),而多巴胺d1類受體激動(dòng)劑則對tnf-α的表達(dá)無影響。3與各自lps刺激組相比,多巴胺預(yù)處理能減少tlr4+/+小鼠腹腔巨噬細(xì)胞tnf-α的分泌及pro-il-1β的表達(dá)(p0.05),而多巴胺預(yù)處理對tlr4-/-小鼠腹腔巨噬細(xì)胞tnf-α的分泌及pro-il-1β的表達(dá)無明顯抑制作用(p0.05)。結(jié)論1.多巴胺能夠抑制lps誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的tnf-α的分泌和pro-il-1β的表達(dá),且該作用不是通過抑制細(xì)胞活力產(chǎn)生的。2.多巴胺通過激活多巴胺d2類受體抑制lps誘導(dǎo)的相關(guān)炎癥反應(yīng)。3.多巴胺抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng),依賴于TLR4。
【關(guān)鍵詞】：多巴胺 炎癥反應(yīng) 巨噬細(xì)胞 多巴胺D2類受體 Toll樣受體4
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R392
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 2 實(shí)驗(yàn)方法15-20
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-25
• 4 討論25-28
• 全文總結(jié)28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 文獻(xiàn)綜述一32-39
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 文獻(xiàn)綜述二39-48
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 致謝48-49
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Agata Mulak;Bruno Bonaz;;Brain-gut-microbiota axis in Parkinson's disease[J];World Journal of Gastroenterology;2015年37期

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本文編號：936980