本文關(guān)鍵詞：脂多糖聯(lián)合三磷酸腺苷對(duì)肺上皮細(xì)胞來(lái)源A549細(xì)胞IL-1β分泌的影響及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的探討白細(xì)胞介素1β(IL-1β)在脂多糖(LPS)聯(lián)合三磷酸腺苷(ATP)誘導(dǎo)的人肺上皮細(xì)胞來(lái)源A549細(xì)胞中的表達(dá)變化及其機(jī)制。方法以肺上皮細(xì)胞來(lái)源的A549細(xì)胞作為研究對(duì)象,采用Western blotting法確認(rèn)A549細(xì)胞中是否存在NLRP3炎癥體各組件蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1)的表達(dá)。檢測(cè)不同濃度LPS(0、1、5、10、50、100μg/ml)對(duì)A549細(xì)胞NLRP3炎癥體通路蛋白表達(dá)(Western blotting檢測(cè))及IL-1β分泌(ELISA法)的影響,選擇最佳LPS濃度。采用LPS聯(lián)合ATP(LPS+ATP)刺激A549細(xì)胞,并檢測(cè)其對(duì)NLRP3炎癥體通路蛋白表達(dá)和IL-1β分泌的影響。采用siRNA干擾A549細(xì)胞NLRP3基因,觀察LPS+ATP誘導(dǎo)的A549細(xì)胞中IL-1β的分泌情況。結(jié)果 Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示,A549細(xì)胞中存在NLRP3炎癥體組件蛋白NLRP3、ASC、caspase-1的表達(dá)。與對(duì)照組比較,LPS單獨(dú)處理細(xì)胞后,NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1p45蛋白表達(dá)增加(P0.05),且呈劑量依賴關(guān)系,但未檢測(cè)到活化形式caspase-1p20蛋白的表達(dá)及細(xì)胞因子IL-1β的分泌。與LPS單獨(dú)刺激組相比,LPS+ATP刺激組可檢測(cè)到活化形式的caspase-1p20蛋白表達(dá)及細(xì)胞因子IL-1β分泌(P0.05)。采用siRNA干擾NLRP3基因表達(dá)可顯著抑制LPS+ATP誘導(dǎo)的IL-1β表達(dá)(P0.05)。結(jié)論 A549細(xì)胞中存在NLRP3炎癥體通路,LPS+ATP誘導(dǎo)A549細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IL-1β在下調(diào)NLRP3基因后顯著減少,初步提示IL-1β的釋放受NLRP3炎癥體途徑調(diào)控。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍呼吸內(nèi)科研究所;
【關(guān)鍵詞】： 白細(xì)胞介素β ATP酶 脂多糖類
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 白細(xì)胞介素1β(IL-1β)主要由激活的巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞合成和釋放,在局部低濃度時(shí)主要發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[1],而大量釋放可引起連鎖和放大效應(yīng),募集更多的炎性細(xì)胞到病變部位釋放大量促炎性介質(zhì),引起炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)[2-3]。IL-1β廣泛參與了包括急性呼吸窘迫綜合征(acute respirat

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本文編號(hào)：934634