本文關(guān)鍵詞：酶解法分離與同源血清培養(yǎng)SD大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：[目的]探討體外酶解法分離、同源血清培養(yǎng)SD大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)的實(shí)驗(yàn)方法。[方法]無菌條件下分離大鼠胃竇組織,酶解法分離制備ICC細(xì)胞懸液,接種于M199完全培養(yǎng)基(含10%大鼠同源血清,不含胎牛血清及重組鼠類干細(xì)胞因子)進(jìn)行培養(yǎng),倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,適時換液,MTT法測定ICC對數(shù)生長曲線,C-kit特異性抗體免疫熒光染色法鑒定ICC,并取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。[結(jié)果]同源血清培養(yǎng)ICC成活并體現(xiàn)其特有的生長曲線及形態(tài)學(xué)特征,C-kit特異性抗體免疫熒光染色證實(shí)細(xì)胞為ICC,且細(xì)胞傳代培養(yǎng)成功。[結(jié)論]酶解法可以對SD大鼠胃竇ICC進(jìn)行分離,在不使用胎牛血清(FBS)及重組鼠類干細(xì)胞因子(SCF)培養(yǎng)的條件下,含大鼠同源血清的M199完全培養(yǎng)基可以完成ICC原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)。該項(xiàng)培養(yǎng)方法可行,為研究ICC生物學(xué)特性及其與胃腸病學(xué)的臨床和基礎(chǔ)關(guān)系奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： Cajal間質(zhì)細(xì)胞 胃竇 SD大鼠 同源血清 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號:81360544)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 胃腸道Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of cajal,ICC)作為胃腸運(yùn)動的起搏細(xì)胞,可以產(chǎn)生自主節(jié)律性慢波電位,通過突起和縫隙連接作用于胃腸平滑肌細(xì)胞,促進(jìn)平滑肌的節(jié)律性舒縮;胃腸神經(jīng)遞質(zhì)通過ICC介導(dǎo)影響平滑肌,形成“腸神經(jīng) ICC-平滑肌細(xì)胞”功能結(jié)合體進(jìn)行調(diào)控胃腸道的

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本文編號：932982