本文關(guān)鍵詞：7型庚型肝炎病毒包膜糖蛋白E2基因的克隆及原核表達(dá)分析

  更多相關(guān)文章： 庚型肝炎病毒 包膜糖蛋白 克隆 表達(dá)分析

【摘要】：為了探究7型庚型肝炎病毒E2基因編碼蛋白作為ELISA試劑盒研發(fā)所需檢測抗原的可能性,建立更為可靠的GBV-C檢測方法,本研究應(yīng)用在線軟件對GBV-C E2基因序列的編碼區(qū)進(jìn)行生物信息學(xué)分析,預(yù)測了E2基因編碼蛋白的抗原表位、空間結(jié)構(gòu)及線性B細(xì)胞表位等;通過逆轉(zhuǎn)錄PCR從7型GBV-C病毒中克隆出E2基因片段,將其克隆到pET-32a載體上,重組載體pET-32a-E2轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21后誘導(dǎo)表達(dá),用12%SDS-PAGE檢測,結(jié)果重組蛋白主要以包涵體形式存在,其分子量大小約為55kD,利用His標(biāo)簽抗體對重組蛋白進(jìn)行Western-blotting驗(yàn)證。結(jié)果表明GBV-C E2蛋白有多個抗原表位點(diǎn),克隆的E2基因序列長度為945bp,重組蛋白以包涵體形式表達(dá),其分子量大小與預(yù)期一致,此研究為GBV-C檢測試劑盒的研制工作奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 庚型肝炎病毒 包膜糖蛋白 克隆 表達(dá)分析
【基金】：國家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目號:81360247)
【分類號】：R373.21
【正文快照】： 庚型肝炎病毒(GBV-C)屬黃病毒科、Pegivirus病毒屬、單鏈RNA病毒。GBV-C基因組全長約9.4kp,包含一個可以編碼6個(E1、E2、NS2、NS3、NS4及NS5)多聚蛋白前體的開放閱讀框[1]。GBV-C的傳播途徑與HIV病毒相似,主要通過母嬰、性以及血液傳播[2]。在發(fā)達(dá)國家,GBV-C在普通人群中的感

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 任浩,朱分祿;庚型肝炎病毒的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).病毒學(xué)分冊;1998年03期

2 廖勝東,詹美云,楊昭徐,孫異臨,郎振為,田瑞光;庚型肝炎病毒致病性的初步研究[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;2000年04期

3 黃健,朱萬孚;庚型肝炎病毒致病性的研究現(xiàn)況[J];國外醫(yī)學(xué).病毒學(xué)分冊;2000年03期

4 曹明媚;戚中田;;庚型肝炎病毒抑制人類免疫缺陷病毒感染及其機(jī)制[J];微生物與感染;2007年01期

5 陳銀石;庚型肝炎病毒研究近況[J];臨床薈萃;1997年16期

6 戎廣亞,孫杰,周繼文,汪興太,趙桂蘭,任繼明,王志杰,張芳,楊守純;利用多組套式引物檢測庚型肝炎病毒RNA[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;1997年02期

7 常錦紅,魏來,陶其敏,杜紹財,王豪,孫焱;逆轉(zhuǎn)錄套式聚合酶鏈反應(yīng)檢測庚型肝炎病毒[J];中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;1997年03期

8 孫柯兒;庚型肝炎病毒研究近況[J];國外醫(yī)學(xué).病毒學(xué)分冊;1997年02期

9 楊玉英;庚型肝炎病毒的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).病毒學(xué)分冊;1997年02期

10 汪興太,莊輝,李河民;庚型肝炎病毒的研究進(jìn)展[J];疾病控制雜志;1997年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 胡兆平;丁子清;葉冬青;黃芬;鄭慧玲;汪興太;;合肥地區(qū)獻(xiàn)血者庚型肝炎病毒的分子生物學(xué)研究[A];中國輸血1999年年會暨紀(jì)念A(yù)BO血型發(fā)現(xiàn)100周年學(xué)術(shù)交流論文專輯[C];1999年

2 胡衛(wèi)江;戚中田;李建秀;胡以平;;庚型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因小鼠的特性研究[A];中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)會青年科技協(xié)會第二屆學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2001年

3 王卓華;葉凱;徐洪;馬輝文;童立恒;彭習(xí)亮;;庚型肝炎病毒E2區(qū)cDNA在畢赤酵母中的表達(dá)及抗原性鑒定[A];廿一世紀(jì)微生物學(xué)發(fā)展前沿與應(yīng)用新技術(shù)研討會論文摘要集[C];2003年

，

本文編號：919443