本文關(guān)鍵詞：利用融合PCR技術(shù)和T載體克隆技術(shù)構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌PhoPR雙組份系統(tǒng)缺失突變載體

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【摘要】：目的基于融合PCR技術(shù)(SOE-PCR)、T載體克隆技術(shù),構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)雙組份系統(tǒng)缺失突變載體的方法。方法利用SOE-PCR技術(shù),將PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂與卡那霉素抗性基因融合,構(gòu)建PhoP、PhoR和PhoPR突變片段,然后將突變片段直接與T載體連接,將其轉(zhuǎn)入E.coli DH5α感受態(tài)細(xì)胞并篩選抗性克隆,進而獲得MTB PhoP、PhoR和PhoPR缺失突變載體。結(jié)果成功構(gòu)建MTB PhoPR雙組份系統(tǒng)缺失突變載體,與傳統(tǒng)方法相比,效率高、周期短。結(jié)論基于融合PCR技術(shù)和T載體克隆技術(shù)成功構(gòu)建MTB PhoPR雙組份系統(tǒng)缺失突變載體,為下一步構(gòu)建MTB突變株以及相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原微生物與免疫學(xué)教研室/石河子大學(xué)《新疆地方與民族高發(fā)病》教育部重點實驗室/《西部地區(qū)高發(fā)人獸共患傳染性疾病防治》協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 PhoPR雙組份系統(tǒng) 缺失突變株 構(gòu)建
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.81260261,81160192) 石河子大學(xué)高層次人才啟動專項(No.RCZX201446)~~
【分類號】：R378.911
【正文快照】： (Department of Pathogen Biology and Immunology,College of Medicine/Xinjiang Key Laboratory of Endemicand Ethnic Disease/Center of Collaborative Innovation for High Zoonotic Infectious Disease Prevention in WesternRegion of Xinjiang Production and Constru

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1 鐘毅;線粒體DNA常見缺失在大片段缺失突變中的作用及其發(fā)生機制[D];華中科技大學(xué);2011年

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本文編號：916218