發(fā)布時(shí)間：2017-09-25 02:08

  本文關(guān)鍵詞：小鼠原始生殖細(xì)胞分離培養(yǎng)方式和生物特性研究

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【摘要】：目的探索一種簡單高效的分離、培養(yǎng)小鼠原始生殖細(xì)胞(PGCs)的方法,為小鼠模型提供充足的PGCs來源。方法體外分離小鼠12.5dpc胚胎生殖嵴,剪碎后用含血清、胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑、卵泡刺激素、重組表皮生長因子的α-MEM培養(yǎng)基進(jìn)行組織塊貼壁培養(yǎng);于倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),采用流式細(xì)胞術(shù)檢測階段性特異性胚胎抗原,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、細(xì)胞免疫熒光等方法檢測干細(xì)胞的多能性基因Oct4及減數(shù)分裂Ⅰ期的幾個(gè)特異性基因的表達(dá)。結(jié)果體外分離培養(yǎng)的小鼠PGCs具有良好的細(xì)胞形態(tài)、極強(qiáng)的增殖能力,SSEA-1表達(dá)陽性,SSEA-4表達(dá)陰性,同時(shí)檢測到Oct4、Stra8、Vasa、SCP3、ZP3表達(dá)均為陽性。結(jié)論利用該實(shí)驗(yàn)方法能培養(yǎng)出高純度、具有良好干性及極強(qiáng)增殖能力的小鼠PGCs,并使該細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 小鼠原始生殖細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 減數(shù)分裂
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助(31101058) 重慶市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(CSTC2011jjA10075)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 目前,已有3種生殖細(xì)胞可以演化出多能干細(xì)胞,它們分別為:胚胎生殖細(xì)胞(embryonic germ cells,EGCs)、胚胎癌細(xì)胞(embryonic carcinoma cells,ECCs)及多潛能種系干細(xì)胞(multipotentgermline stem cells,MGSC-s)[1-3]。其中,來源于原始生殖細(xì)胞(primordial germ cells,PGCs)的EG

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王娟,楊娜娜,杜立新;從原始生殖細(xì)胞分離克隆雞胚胎生殖細(xì)胞的研究[J];中國生物工程雜志;2004年09期

2 王娟,杜立新;影響雞原始生殖細(xì)胞分離克隆因素的研究(簡報(bào))[J];實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào);2004年03期

3 韓毅冰，于康震，周琦，，秦鵬春;雞胚血液中原始生殖細(xì)胞的分離及其培養(yǎng)的研究[J];生物技術(shù);1996年02期

4 華進(jìn)聯(lián),劉雨瀟,董武子,楊煒峰,竇忠英;原始生殖細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)育與EG細(xì)胞[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2005年03期

5 李贊東,李相芝,趙東風(fēng),Takashi KUWANA;禽類原始生殖細(xì)胞的遷移能力[J];動物學(xué)報(bào);2003年06期

6 秦潔,肖小s

本文編號：914749