本文關(guān)鍵詞：熒光素二乙酸酯熒光微孔板法在細(xì)胞活力測(cè)定中的應(yīng)用

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【摘要】：目的評(píng)估熒光素二乙酸酯(FDA)微孔板檢測(cè)法在細(xì)胞活力測(cè)定中的應(yīng)用。方法培養(yǎng)板接種細(xì)胞,加入FDA孵育一定時(shí)間,多功能微板分析儀測(cè)定熒光值。評(píng)價(jià)FDA孵育時(shí)間、濃度及其他影響因素對(duì)檢測(cè)精確度的影響,并與四甲基偶氮唑鹽(MTT)方法在H_2O2損傷及細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)方面進(jìn)行比較。結(jié)果隨著孵育時(shí)間的延長(zhǎng),熒光值與細(xì)胞數(shù)的相關(guān)系數(shù)隨之增加,27~30 min時(shí)可達(dá)到0.99。FDA終濃度在10~30μg/ml時(shí),熒光值與細(xì)胞數(shù)的相關(guān)系數(shù)較高。在H_2O2損傷模型檢測(cè)中,與四甲基偶氮唑鹽相比,FDA在H_2O2高濃度時(shí)相關(guān)性更強(qiáng)。結(jié)論 FDA法檢測(cè)細(xì)胞活力穩(wěn)定可靠,適用于多種條件下的細(xì)胞活力檢測(cè)及藥理學(xué)研究。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所藥物靶點(diǎn)研究與新藥篩選北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 熒光素二乙酸酯 熒光 微孔板檢測(cè) 細(xì)胞活力 四甲基偶氮唑鹽 細(xì)胞毒
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81470159) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與健康科技創(chuàng)新工程(2016-I2M-3-007)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： Acta Acad Med Sin,2016,38(6):710-714的熒光物質(zhì)。而死細(xì)胞或活性較差的細(xì)胞中非特異性酯酶活性較差,則無熒光或較暗的熒光。該類熒光探針中最常用的是熒光素二乙酸酯(fluorescein diace-tate,FDA)及其衍生物。因價(jià)格低廉、操作簡(jiǎn)單、熒光信號(hào)較強(qiáng)而廣為應(yīng)用[1]。FDA及其衍，

本文編號(hào)：912907