本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌FtsZ的異源表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)研究

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【摘要】：作為細(xì)菌分裂所必需的微管蛋白類似物,絲狀溫度敏感蛋白Z(filamentous temperature-sensitive protein Z,FtsZ)被認(rèn)為是一個(gè)具有潛力的藥物作用新靶點(diǎn)。為了構(gòu)建高純度的FtsZ重組蛋白分離純化體系,探討其酶學(xué)性質(zhì),該研究利用大腸桿菌BL21異源表達(dá)結(jié)核分枝桿菌FtsZ重組蛋白,通過(guò)Ni親和層析柱和G-50層析柱純化目的蛋白,采用孔雀石綠法和90°光散射法測(cè)定FtsZ重組蛋白的GTP酶活和蛋白聚集。研究結(jié)果表明:成功獲得具有生物學(xué)活性的結(jié)核分枝桿菌FtsZ重組蛋白,其相對(duì)分子質(zhì)量約為49kD;該酶最適反應(yīng)溫度為37℃,最適pH為6.8,金屬離子Mg~(2+)和K~+對(duì)FtsZ重組蛋白酶活具有促進(jìn)作用,有機(jī)溶劑DMSO和TritonX-100的體積分?jǐn)?shù)分別高于0.1%和0.005%時(shí)對(duì)酶活有顯著抑制作用(P0.05)。此外,FtsZ重組蛋白在加入底物GTP誘導(dǎo)后,快速聚集。本實(shí)驗(yàn)利用基因工程技術(shù)成功獲得具有生物活性的FtsZ重組蛋白,并明確了該蛋白質(zhì)的酶學(xué)性質(zhì),為其進(jìn)一步的研究和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 絲狀溫度敏感蛋白Z(FtsZ) 異源表達(dá) 分離純化 酶活 蛋白聚集
【基金】：浙江省新苗人才計(jì)劃(2015R410029)
【分類號(hào)】：R378.911
【正文快照】： (Life Science Research,2016,20(6):486~491)肺結(jié)核是一種由結(jié)核分枝桿菌引起的肺部慢性感染性疾病[1],是目前導(dǎo)致人類死亡的前三大傳染性疾病之一。在導(dǎo)致結(jié)核病流行的眾多因素中,結(jié)核病的耐藥性已經(jīng)成為最重要的因素之一[2],人類病原微生物耐藥性的提高,嚴(yán)重影響傳染性疾病

【相似文獻(xiàn)】

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1 程婕;龔毅;楊凌;;細(xì)胞色素P450酶系的異源表達(dá)研究[J];河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年03期

2 ;[J];;年期

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本文編號(hào)：911289