人臍帶血內(nèi)皮祖細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定
本文關(guān)鍵詞:人臍帶血內(nèi)皮祖細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定
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【摘要】:目的:分離、培養(yǎng)、鑒定人臍帶血內(nèi)皮祖細胞(EPCs),為獲取大量血管內(nèi)皮祖細胞提供方法。方法:臍帶血采集后,采用6%羥乙基淀粉沉降法和密度梯度離心法獲取臍帶血單核細胞,再將單核細胞接種于鋪設(shè)有纖維連接蛋白的培養(yǎng)瓶中,經(jīng)過體外誘導(dǎo)、培養(yǎng)、分化,完成傳代擴增;通過免疫組織化學(xué)、免疫熒光染色、流式細胞術(shù)對細胞進行鑒定。結(jié)果:細胞培養(yǎng)第5天呈現(xiàn)集落樣生長,單個細胞呈圓形或梭形,2周后細胞長滿瓶底,呈鵝卵石樣外觀。免疫組織化學(xué)檢測顯示,CD31兔抗人單克隆抗體陽性率91.5%,Anti-Von Willebrand factor antibody(v WF)相關(guān)抗原兔抗人單克隆抗體的陽性表達率為72.4%;細胞免疫熒光染色檢測顯示,吞噬Dil標(biāo)記的乙酰低密度脂蛋白(~+),發(fā)出紅色熒光;結(jié)合FITC標(biāo)記的荊豆凝集素Ⅰ(~+),發(fā)出綠色熒光;雙染(~+),呈黃色熒光。流式細胞術(shù)檢測CD34陽性率93%,血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2陽性率88.5%,CD133陽性率84.8%。結(jié)論:從臍帶血中可獲取大量CD34~+、VEGFR-2~+及CD133~+血管內(nèi)皮祖細胞。
【作者單位】: 蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤放療科;蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院中心實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 干細胞 內(nèi)皮祖細胞 人臍帶血
【基金】:安徽省自然科學(xué)基金項目(1308085MH164) 蚌埠醫(yī)學(xué)院科研創(chuàng)新計劃(Byycx1544)
【分類號】:R329.28
【正文快照】: 早在1997年,ASAHARA等[1]首次從人外周血中分離出一種表達內(nèi)皮細胞特異性抗原的單核細胞,其血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)及CD34都顯示為陽性,顯微鏡下呈梭形生長,而且其結(jié)構(gòu)成管腔樣,將其定名為內(nèi)皮祖細胞(EPCs)。EPCs作為血管內(nèi)皮細胞的前體細胞,具有游走性,并可逐步
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3 汪漣明,孫酬經(jīng),歐陽淹,王紅葉,顧錫榮,錢美華;低能量激光與集落刺激因子對人臍帶血造血細胞的增殖作用[J];激光生物學(xué)報;1997年04期
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,本文編號:907269
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