本文關(guān)鍵詞：HEK293T細(xì)胞表達(dá)的單核細(xì)胞趨化蛋白1促進(jìn)巨噬細(xì)胞遷移

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【摘要】：目的構(gòu)建巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)真核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染人胚腎HEK293T細(xì)胞,驗(yàn)證其對(duì)巨噬細(xì)胞的趨化作用。方法小鼠基因組DNA作模板,用PCR法獲得MCP-1啟動(dòng)子區(qū)基因片段,插入p FLAGCMV1載體。用雙酶切法和測序鑒定正確后,將構(gòu)建好的病毒載體轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,用Western blot法檢測MCP-1的表達(dá),用Transwell~(TM)實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞分泌的MCP-1對(duì)巨噬細(xì)胞的趨化作用。結(jié)果重組載體酶切鑒定在相應(yīng)位置有目的片段,轉(zhuǎn)染單核細(xì)胞趨化因子重組載體后的HEK293T細(xì)胞有MCP-1表達(dá),轉(zhuǎn)染后HEK293T細(xì)胞分泌的MCP-1明顯增加巨噬細(xì)胞的遷移。結(jié)論HEK293T細(xì)胞表達(dá)的MCP-1明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的遷移。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院腎臟內(nèi)科;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部醫(yī)學(xué)遺傳與發(fā)育生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細(xì)胞 單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-) 真核表達(dá)載體 載體構(gòu)建
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81370811)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 巨噬細(xì)胞在機(jī)體的生理和病理過程中均發(fā)揮著重要作用。生理狀態(tài)下,巨噬細(xì)胞主要維持組織穩(wěn)態(tài),在機(jī)體組織受損后,巨噬細(xì)胞會(huì)快速遷移到受損部位,發(fā)揮促炎、抗炎、抗感染等功能[1]。巨噬細(xì)胞參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展,影響疾病的預(yù)后,如新月體型腎小球腎炎肺動(dòng)脈高壓、肺纖維化、

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：902897