本文關(guān)鍵詞：HEK293T細胞表達的單核細胞趨化蛋白1促進巨噬細胞遷移

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【摘要】：目的構(gòu)建巨細胞病毒(CMV)啟動子驅(qū)動的單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)真核表達載體,轉(zhuǎn)染人胚腎HEK293T細胞,驗證其對巨噬細胞的趨化作用。方法小鼠基因組DNA作模板,用PCR法獲得MCP-1啟動子區(qū)基因片段,插入p FLAGCMV1載體。用雙酶切法和測序鑒定正確后,將構(gòu)建好的病毒載體轉(zhuǎn)染HEK293T細胞,用Western blot法檢測MCP-1的表達,用Transwell~(TM)實驗檢測轉(zhuǎn)染后細胞分泌的MCP-1對巨噬細胞的趨化作用。結(jié)果重組載體酶切鑒定在相應(yīng)位置有目的片段,轉(zhuǎn)染單核細胞趨化因子重組載體后的HEK293T細胞有MCP-1表達,轉(zhuǎn)染后HEK293T細胞分泌的MCP-1明顯增加巨噬細胞的遷移。結(jié)論HEK293T細胞表達的MCP-1明顯增強巨噬細胞的遷移。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院腎臟內(nèi)科;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部醫(yī)學(xué)遺傳與發(fā)育生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細胞 單核細胞趨化蛋白(MCP-) 真核表達載體 載體構(gòu)建
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81370811)
【分類號】：R363
【正文快照】： 巨噬細胞在機體的生理和病理過程中均發(fā)揮著重要作用。生理狀態(tài)下,巨噬細胞主要維持組織穩(wěn)態(tài),在機體組織受損后,巨噬細胞會快速遷移到受損部位,發(fā)揮促炎、抗炎、抗感染等功能[1]。巨噬細胞參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展,影響疾病的預(yù)后,如新月體型腎小球腎炎肺動脈高壓、肺纖維化、

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本文編號：902897