本文關(guān)鍵詞：人白介素-38原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其蛋白表達(dá)、純化

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【摘要】：$目的%構(gòu)建人白介素(interleukin,IL)-38原核表達(dá)載體,原核表達(dá)IL-38重組蛋白、純化及活性分析。[方法]PCR擴(kuò)增IL-38成熟蛋白編碼區(qū),構(gòu)建IL-38原核表達(dá)載體p ET-44-h IL-38,轉(zhuǎn)化BL21(DE3)菌株,用IPTG誘導(dǎo),表達(dá)IL-38重組蛋白,并利用其C末端的組氨酸標(biāo)簽進(jìn)行鎳離子親和層析純化,將純化的重組IL-38作用于脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞,研究純化IL-38蛋白的生物學(xué)活性。[結(jié)果]構(gòu)建的IL-38原核表達(dá)載體測序結(jié)果與Gen Bank中基因序列一致;IPTG誘導(dǎo)產(chǎn)生的IL-38蛋白主要以可溶性形式存在,純化的目的蛋白經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳分析和Western Blot鑒定發(fā)現(xiàn),蛋白純度可達(dá)98%,細(xì)胞實驗證明純化的目的蛋白具有較高的生物學(xué)活性。[結(jié)論]成功構(gòu)建了IL-38的原核表達(dá)載體,制備了具有生物活性的IL-38重組蛋白。
【作者單位】： 寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)研究室;
【關(guān)鍵詞】： IL- 原核表達(dá)載體 重組蛋白 純化
【基金】：浙江省教育廳科研項目(“重組IL-38對哮喘氣道炎癥的作用及應(yīng)用研究”,No.Y201327689) 浙江省公益技術(shù)應(yīng)用研究(實驗動物)計劃項目(“IL-38轉(zhuǎn)基因小鼠的建立及在高脂飲食誘導(dǎo)肥胖小鼠模型中的作用”,No.2016C37139)
【分類號】：Q78;R392
【正文快照】： 白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-38是新近發(fā)現(xiàn)的IL-1家族(IL-1F)細(xì)胞因子的第10個家族成員,是2001年首先用寡核苷酸探針雜交及生物信息學(xué)技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)并鑒定的細(xì)胞因子[1-2],曾被稱為IL-1HY2。IL-38基因橫跨7.8 kb,其中包含5個外顯子,編碼一個由152個氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì),其分

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1 劉碩;黃鐘;羅新萍;劉志剛;陳思;;家蠶蠶蛹過敏原幾丁質(zhì)酶基因的克隆和原核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2010年05期

2 楊樹國;王雅靜;朱曉燕;帖超男;廖琳;;陰道毛滴蟲黏附蛋白33基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];四川動物;2008年06期

3 巴彩鳳;聶茹;;pGEX-4T-1-cMC4R原核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年23期

4 耿梅;陳清;徐麗慧;張延亭;何賢輝;;人白細(xì)胞介素7重組蛋白原核表達(dá)載體在大腸桿菌中的表達(dá)和鑒定[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2010年04期

5 劉芳;黨國全;;融合毒素TOP_3表達(dá)載體的構(gòu)建[J];青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年03期

6 劉成倩;王靜;李紅;于宗幸;易建中;陳磊;;雞干擾素-α基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及高效表達(dá)[J];中國畜牧獸醫(yī);2014年04期

7 劉華偉;張宏;孫超;王慶賀;宋艷瑞;;增強(qiáng)型綠色熒光蛋白原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[J];西北農(nóng)業(yè)學(xué)報;2012年02期

8 任圣俊,蔣惠秋,顧健人;大腸桿菌胞嘧啶脫氨酶基因克隆及其原核表達(dá)載體構(gòu)建、表達(dá)[J];科學(xué)通報;1997年19期

9 李德玲;張前軍;顧巍;;胰島素前體基因克隆及其原核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年01期

10 劉占通;崔保安;舒暢;金喜新;陳紅英;楊明凡;魏戰(zhàn)勇;;豬α干擾素原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2006年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄔玉蘭;劉志剛;;牛奶主要過敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會2009年全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

2 劉全華;華麗;霍婧;鮑一笑;;人白介素13原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達(dá)[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

3 劉林林;王鐵君;楊艷明;蘇清秀;殷勝松;張奇;龔守良;;小鼠分泌型內(nèi)皮抑素原核表達(dá)載體pNZ44-ssEndostatin的構(gòu)建及表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會放射腫瘤治療學(xué)分會六屆二次暨中國抗癌協(xié)會腫瘤放療專業(yè)委員會二屆二次學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

4 楊海杰;管寶全;羅文新;李少偉;鮮陽凌;張軍;夏寧邵;;含分泌信號的原核表達(dá)載體的組建及應(yīng)用[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第八屆會員代表大會暨全國學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

5 彭旭;袁順宗;王曉娟;甘成軍;王慶紅;陳烯偉;張小容;胡曉紅;羅高興;吳軍;;人HT036蛋白的原核表達(dá)及鑒定[A];第八屆全國燒傷外科學(xué)年會論文匯編[C];2007年

6 李慎濤;歐陽紅生;張玉靜;張銳;廖曉萍;孫博興;張永亮;;豬肌生成抑制素基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊）[C];2001年

7 李慎濤;歐陽紅生;張玉靜;張銳;廖曉萍;孫博興;張永亮;;豬肌生成抑制素基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第八屆會員代表大會暨全國學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

8 徐海燕;徐志偉;;人胰島素樣生長因子-1的原核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];山東免疫學(xué)會、山東微生物學(xué)會醫(yī)學(xué)微生物學(xué)專業(yè)委員會、山東省醫(yī)學(xué)會微生物學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)委員會、山東省醫(yī)藥生物技術(shù)學(xué)會2001年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2001年

9 李士澤;張艷宇;張玉靜;;凋亡蛋白融合基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及序列分析[A];動物生理生化學(xué)分會第八次學(xué)術(shù)會議暨全國反芻動物營養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

10 鮑德明;胡乃中;沈際佳;石海;許建明;;人巨噬細(xì)胞金屬彈力酶催化域基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉芳;1.Keap1和p65蛋白相互作用及其作用機(jī)制研究 2.Mayven不同截短體原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)和純化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

2 王桂武;重組IGFBP-4蛋白的表達(dá)、純化、晶體生長及其對鹿茸細(xì)胞增殖抑制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

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本文編號：901527