本文關(guān)鍵詞：懸浮培養(yǎng)的小鼠骨間充質(zhì)干細(xì)胞對T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的:研究懸浮培養(yǎng)的小鼠骨間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)對T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制。方法:采用低吸附細(xì)胞培養(yǎng)皿培養(yǎng)小鼠骨懸浮MSC,采用貼附細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)小鼠貼壁MSC。在光學(xué)顯微鏡下觀察懸浮MSC的形態(tài)并進(jìn)行成骨和成脂肪誘導(dǎo)分化。應(yīng)用以流式細(xì)胞術(shù)檢測懸浮MSC的免疫表型。收獲懸浮MSC和貼壁MSC的培養(yǎng)上清,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測和CFSE法比較懸浮MSC抑制T細(xì)胞增殖的能力。采用定量PCR分析不同培養(yǎng)上清對T細(xì)胞表達(dá)的免疫因子的影響。采用定量PCR檢測懸浮MSC表達(dá)的免疫調(diào)節(jié)因子。結(jié)果:懸浮培養(yǎng)的小鼠骨MSC呈現(xiàn)為懸浮球狀,具有成骨和成脂肪分化能力。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明,懸浮MSC高表達(dá)CD29、CD44、Sca-1和CD105,低表達(dá)CD11b、CD45、CD31和Ia。CFSE法結(jié)果提示,懸浮MSC培養(yǎng)上清能夠抑制T細(xì)胞增殖。定量PCR檢測結(jié)果表明,懸浮MSC上清能夠抑制T細(xì)胞表達(dá)干擾素γ和白介素17A的表達(dá)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),相對于貼壁MSC,懸浮MSC表達(dá)的白介素6和轉(zhuǎn)化生長因子β1的水平較高。結(jié)論:懸浮法培養(yǎng)獲得的MSC能夠抑制T細(xì)胞增殖,其對T細(xì)胞調(diào)節(jié)作用與貼壁MSC不同。
【作者單位】： 河北北方學(xué)院研究生院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞生物學(xué)研究室;中國人民解放軍空軍總醫(yī)院消化科;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院科技部;中國人民解放軍空軍總醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】： 間充質(zhì)干細(xì)胞 T細(xì)胞 免疫調(diào)節(jié)
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(81101342,81500083);國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81371945,81572159) 北京市自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(7132133) 空軍總醫(yī)院院級課題(KZ2014023)
【分類號】：R329.28
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)材料和方法是一種最早在骨髓中被發(fā)現(xiàn)的非造血干細(xì)胞,隨后研究人員又發(fā)現(xiàn)MSC也存在于骨、臍帶、脂肪等多實(shí)驗(yàn)動物種組織中[1-5]。MSC具有強(qiáng)大的造血支持能力,參健康C57BL/6和BALB/cl小鼠,2-3周齡,雌雄不與調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞的分化和遷移

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本文編號：897895