本文關(guān)鍵詞：小鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞分離、純化

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【摘要】：目的:探討小鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)最佳分離條件,提高細(xì)胞獲得率與純度,以便后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。方法:小鼠摘除眼球取血,設(shè)置離心力、離心時(shí)間、實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度等梯度優(yōu)化,分別采用EDTA-K2、肝素、枸櫞酸鈉抗凝,Ficoll密度梯度離心法分離單個(gè)核細(xì)胞,直接進(jìn)行貼壁培養(yǎng)和分析獲得率、純度,計(jì)數(shù)存活率。結(jié)果:Ficoll密度梯度離心法經(jīng)條件優(yōu)化后分離的PBMC純度可達(dá)85%,細(xì)胞獲得率最高可達(dá)80%以上,活細(xì)胞百分率在92%以上。結(jié)論:Ficoll密度梯度離心法在優(yōu)化條件下可有效地分離PBMC,對(duì)后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)無影響。
【作者單位】： 佳木斯市紅十字醫(yī)院;佳木斯大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 小鼠 Ficoll密度梯度離心 PBMC
【基金】：黑龍江省普通高等學(xué)校青年學(xué)術(shù)骨干支持計(jì)劃,編號(hào):1253G057 佳木斯大學(xué)自然科學(xué)基礎(chǔ)研究類重點(diǎn)項(xiàng)目,編號(hào):Sjz2012-11
【分類號(hào)】：R-33
【正文快照】： 外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononucle-ar cells,PBMCs)包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。是免疫系統(tǒng)的重要組成,是研究免疫老化和衰老的主要依據(jù)。研究T、B淋巴細(xì)胞首要分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,主要的分離方法是Ficoll-hypaque密度梯度離心法,因血液中各組成成分的沉降系數(shù)存在

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