發(fā)布時(shí)間：2017-09-12 18:38

  本文關(guān)鍵詞：連接肽長度對(duì)單鏈抗體與小分子半抗原結(jié)合力的影響

  更多相關(guān)文章： 單鏈抗體 連接肽 小分子半抗原 結(jié)合力

【摘要】：為了分析單鏈抗體的連接肽長度對(duì)其與小分子半抗原結(jié)合力的影響,本研究以含(G_4S)_3連接肽的伏馬菌素特異單鏈抗體基因H2為模板,PCR擴(kuò)增獲得含G_4S和(G_4S)_2連接肽的單鏈抗體編碼基因,分別命名為H2-5和H2-10,通過基因工程操作構(gòu)建到p HENHi載體中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌XL1-Blue進(jìn)行原核表達(dá),純化后利用ELISA檢測單鏈抗體的親和力。結(jié)果顯示含不同長度連接肽的單鏈抗體均能在大腸桿菌中可溶性表達(dá),單鏈抗體結(jié)合力與連接肽長度的關(guān)系為(G_4S)_3G_4S(G_4S)_2,即單鏈抗體H2與其抗原伏馬菌素的親和力最高,其次為H2-5和H2-10抗體。因此,含有較長連接肽的單鏈抗體能夠自身折疊形成有活性的蛋白,并表現(xiàn)出與小分子半抗原更強(qiáng)的結(jié)合能力。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞與基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 單鏈抗體 連接肽 小分子半抗原 結(jié)合力
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31260227,31660258) 中國博士后科學(xué)基金(2015M582758XB) 貴州省科技創(chuàng)新人才團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(黔科合人才團(tuán)隊(duì)(2015)4021) 貴州省科技項(xiàng)目(黔科合J字[2013]2058號(hào)和黔科合LH字[2014]7092) 貴州省高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新人才支持計(jì)劃(黔教合KY字[2014]244) 貴陽市科技計(jì)劃項(xiàng)目(筑科合同[2014]37號(hào)) 國家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃(201310660004)共同資助
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： *共同第一作者Effect of the Linker Length of sc Fv Antibody on Its Binding Capacity toSmall Molecular HaptenXia Xue*Shi Yuling*Yu Yanqin Feng Min Wang Tingting Fang Rong Huang Shunli Zeng Zhu HuZuquan**Key Laboratory of Cell and Gene Engineering,Guiyang,5

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳萍,鄧健蓓,韓驊,藥立波,蘇成芝;抗人腫瘤壞死因子-α單鏈抗體與其配體的相互作用[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2000年04期

2 費(fèi)晉秀,任軍,苗繼延;單鏈抗體構(gòu)建、表達(dá)及臨床應(yīng)用的研究現(xiàn)狀[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期

3 耿春蘭;單鏈抗體的生物學(xué)特性及應(yīng)用前景[J];邯鄲醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報(bào);2000年05期

4 林建波,劉志剛,俞煒源;單鏈抗體-堿性磷酸酶檢測系統(tǒng)的建立[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2001年04期

5 王素莉 ,田恩江,陳昆明,陳祖培;抗甲狀腺刺激性免疫球蛋白單鏈抗體在大腸桿菌中的表達(dá)[J];武警醫(yī)學(xué);2002年05期

6 劉德新,李小鷹,陳瑞晗,郝好杰,王琰;人抗地高辛單鏈抗體在大腸桿菌的表達(dá)[J];中國分子心臟病學(xué)雜志;2002年02期

7 王臣,侯利華,張彥明,李建民,廖振林,杜桂鑫,陳薇,孫啟鴻,童貽剛;抗人整合素ανβ_3單鏈抗體的構(gòu)建和表達(dá)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2004年02期

8 李民友,虞東方,張海濤,馮哲玲,李秀英,劉祖國,朱振宇;應(yīng)用蛋白質(zhì)L檢測和純化培養(yǎng)上清液中的單鏈抗體[J];免疫學(xué)雜志;2004年03期

9 楊康鵑,孟繁平,de Baets M.;抗乙酰膽堿受體單鏈抗體的純化[J];延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào);2004年02期

10 司進(jìn),朱蔭昌,曹利民,王曉婷,梁幼生,管曉虹;抗弓形蟲主要表面抗原1單鏈抗體的篩選及鑒定[J];中國血吸蟲病防治雜志;2005年03期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李研東;韓雪;趙彥嶺;米振杰;高振同;李肖莉;;單鏈抗體的制備及其在殘留檢測上的應(yīng)用前景[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物藥品學(xué)分會(huì)第四屆全國會(huì)員代表大會(huì)暨2011學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

2 嚴(yán)丹丹;楊福輝;方瑾;宋今丹;;抗人大腸癌基因工程雙價(jià)單鏈抗體的構(gòu)建及表達(dá)[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

3 郭崇志;王玉霞;孫曼霽;;抗電鰩乙酰膽堿酯酶單克隆抗體3F3的單鏈抗體高級(jí)結(jié)構(gòu)的計(jì)算機(jī)模擬及其抑制酶活性機(jī)理探討[A];第七屆全國生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2000年

4 胡曉林;張春明;;抗纖維蛋白單鏈抗體及其非共價(jià)二聚體基因的構(gòu)建、表達(dá)和功能比較研究[A];中國免疫學(xué)會(huì)第五屆全國代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

5 武婕;柯昌文;李暉;陳秋霞;周杰;張欣;鄒麗容;;特異結(jié)合人禽流感病毒H5N1的scFv分子生物學(xué)活性性能鑒定[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2011年

6 唐勇;甄永蘇;;抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移單鏈抗體的構(gòu)建、表達(dá)和三維結(jié)構(gòu)模建[A];中國生物工程學(xué)會(huì)第三次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2001年

7 夏小兵;成軍;楊繼珍;鐘彥偉;王剛;方宏清;劉研;李克;董菁;;抗HBsAg單鏈抗體靶向干擾素的構(gòu)建及原核表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國感染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

8 武婕;陳秋霞;鄒麗容;李暉;周杰;莫艷玲;柯昌文;;特異結(jié)合人禽流感病毒H5N1的scFv分子性能鑒定[A];2010廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2010年

9 劉夢元;黃華j;尹長城;王祥斌;;抗TNF-α單鏈抗體的構(gòu)建、表達(dá)及一步柱上純化和復(fù)性[A];中國生物工程學(xué)會(huì)第四次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2005年

10 武婕;柯昌文;陳秋霞;李暉;周杰;張欣;鄒麗容;;特異結(jié)合人禽流感病毒H5N1的scFv分子性能鑒定[A];2011廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李鐵軍;抗甲胺磷噬菌體單鏈抗體庫的構(gòu)建、篩選及單鏈抗體的表達(dá)與特性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

2 霍銳;人源含硒單鏈抗體模擬谷胱甘肽過氧化物酶[D];吉林大學(xué);2008年

3 楊西川;抗人血管內(nèi)皮生長因子單鏈抗體的構(gòu)建、表達(dá)及活性鑒定[D];華西醫(yī)科大學(xué);1998年

4 劉艷;二甲氧基硫代磷酸酯類農(nóng)藥單克隆抗體研制及單鏈抗體三維結(jié)構(gòu)模擬[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

5 何卓;日本血吸蟲未成熟卵單鏈抗體庫的構(gòu)建、篩選及在疫苗研究中的應(yīng)用[D];中南大學(xué);2008年

6 趙澤文;抗人Endoglin單鏈抗體的制備及其在荷人卵巢癌裸鼠體內(nèi)放射免疫顯像初探[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

7 萬忠海;抗PEA單抗和單鏈抗體制備及在綠膿感染中的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2008年

8 熊盛;重組人源抗HBsAg單鏈抗體在大腸桿菌和巴氏畢赤酵母中的表達(dá)、純化與性質(zhì)鑒定[D];華南理工大學(xué);2002年

9 張葵;抗人EpCAM單鏈抗體的制備及其應(yīng)用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

10 胡學(xué)軍;抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)單鏈抗體基因克隆及其在大腸桿菌和煙草中的表達(dá)[D];大連理工大學(xué);2002年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐飛虎;抗肺癌單鏈抗體偶聯(lián)綠色熒光蛋白基因的構(gòu)建及表達(dá)研究[D];浙江大學(xué);2003年

2 張曉鵬;抗異檸檬酸脫氫酶單鏈抗體及單克隆抗體的制備[D];福建農(nóng)林大學(xué);2010年

3 樂s，

本文編號(hào)：838888