華支睪吸蟲parkin蛋白的分子生物學特征研究
本文關鍵詞:華支睪吸蟲parkin蛋白的分子生物學特征研究
【摘要】:目的了解華支睪吸蟲Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物學特性。方法從華支睪吸蟲cDNA文庫獲得Parkin的cDNA全長,NCBI搜索與之相似度高的基因序列,預測其所含結構域和功能;應用MEGA5程序?qū)碜訥enBank中與之有較高相似度的基因序列進行分析,構建基因進化樹;原核表達重組融合蛋白CsParkin,純化后免疫Blab/c小鼠,獲得多克隆抗體,采用Western blot鑒定天然CsParkin;采用qRT-PCR測定CsParkin基因在不同發(fā)育階段的表達水平。結果 CsParkin蛋白含有5個結構域,分別是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白結構;該蛋白與人及各種動物的Parkin有很高的相似度,與其他吸蟲有更近的進化關系;Western blot顯示原核表達的重組CsParkin,與天然CsParkin分子質(zhì)量相同,均為45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表達量高于成蟲;免疫組化顯示CsParkin主要分布于成蟲受精囊中的精子及口吸盤和睪丸,在囊蚴中廣泛分布。結論肝吸蟲CsParkin屬蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素連接酶3的功能結構,推測其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在華支睪吸蟲的生長過程中發(fā)揮作用。
【作者單位】: 濱州醫(yī)學院病原生物學教研室;
【關鍵詞】: 華支睪吸蟲 Parkin 泛素連接酶
【基金】:煙臺市科技計劃項目(No.2015ZH084)
【分類號】:R383.22
【正文快照】: *?**?華支睪吸蟲是一種食源性寄生蟲,引起華支睪吸蟲病,主要流行于中國、韓國和越南北部,造成約3500萬人感染[1]。華支睪吸蟲為雌雄同體,成蟲寄生于食魚類哺乳動物的肝膽管內(nèi)。囊蚴為感染期,廣泛存在于流行區(qū)的淡水魚體內(nèi)。當哺乳動物生食或食用不熟的魚肉時,囊蚴經(jīng)過胃部到達
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,本文編號:824811
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