去血清饑餓法對卵巢顆粒細(xì)胞自噬因子LC3和Beclin-1表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-09-08 03:50
本文關(guān)鍵詞:去血清饑餓法對卵巢顆粒細(xì)胞自噬因子LC3和Beclin-1表達(dá)的影響
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【摘要】:目的觀察去血清饑餓法對卵巢顆粒細(xì)胞自噬因子LC3和Beclin-1表達(dá)的影響。方法用去血清的培養(yǎng)液誘導(dǎo)處于對數(shù)生長期的顆粒細(xì)胞,0、4、12、24 h后用單丹磺酰戊二胺(MDC)熒光染色法檢測自噬體的形成,反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCT)和Western blot方法分別檢測顆粒細(xì)胞微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(MAPLC3)和Beclin-1 mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果隨著去血清時(shí)間的延長,MDC陽性細(xì)胞數(shù)及自噬泡數(shù)量增多;4 h后LC3-Ⅱ及Beclin-1mRNA表達(dá)開始增加,且隨著時(shí)間增加有增加趨勢[LC3-Ⅱ:(0.21±0.02)、(0.45±0.12)、(0.60±0.05)、(0.74±0.03),P0.05;Beclin-1:(0.20±0.06)、(0.37±0.11)、(0.52±0.07)、(0.69±0.07),P0.05];4 h后蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Beclin-1蛋白表達(dá)亦增加,且隨時(shí)間增加有增加的趨勢[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ:(0.12±0.05)、(0.32±0.09)、(0.63±0.07)、(0.92±0.04),P0.01;Beclin-1:0,(61±0.01)、(0.83±0.11)、(1.09±0.05)、(1.35±0.10),P0.05]。結(jié)論去血清饑餓可誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞自噬的發(fā)生,這可能與卵泡發(fā)育和閉鎖的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。
【作者單位】: 浙江嘉興學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 去血清饑餓法 顆粒細(xì)胞 自噬因子 LC Beclin-
【基金】:嘉興市科技局課題(2013AY21046)資助 浙江省教育廳科研項(xiàng)目資助(Y201534052) 浙江省大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目資助(2015R417003)
【分類號】:R321
【正文快照】: 顆粒細(xì)胞是組成卵泡的最大細(xì)胞群,顆粒細(xì)胞的增殖與凋亡對卵泡的發(fā)育、成熟及閉鎖等密切相關(guān)。卵泡的發(fā)育過程不僅僅與顆粒細(xì)胞增殖與凋亡相關(guān),近年來,人們發(fā)現(xiàn)與顆粒細(xì)胞的自噬也關(guān)系密切[1]。自噬主要是降解由于各種原因損壞的細(xì)胞器和一些大分子物質(zhì),為其他細(xì)胞提供賴以生,
本文編號:811723
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