本文關(guān)鍵詞：臍血單個核細胞分離方法的比較研究

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【摘要】：目的:探討臍血單個核細胞的提取、凍存及復(fù)蘇工藝,實現(xiàn)臍血單個核細胞的長久保存。方法:采集足月妊娠者臍血40~180ml,運用Ficoll密度梯度離心法和AXP臍帶血自動分離系統(tǒng)與Ficoll密度梯度離心法兩步法分離臍血單個核細胞,采用非程控降溫法降溫,將細胞保存于-196℃液氮中。比較分析不同分離方法分離人臍血單個核細胞的細胞得率及活力;冷凍保護液配制分2組:無血清培養(yǎng)液+10%DMSO+10%右旋糖酐和自體血漿+10%DMSO+10%右旋糖酐,根據(jù)凍存時間進行細胞復(fù)蘇,分析其凍存前后的細胞活力、單個核細胞回收率、CD34+細胞數(shù)和CFU形成能力。結(jié)果:Ficoll密度梯度離心后獲得的臍血單個核細胞活力為99.70%±0.30%,回收率為54.40%±4.52%;兩步法分離臍血單個核細胞活力為99.60%±0.40%,回收率為62.12%±3.78%,2組回收率差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。凍存6、12、24個月后,各時間點單個核細胞無血清培養(yǎng)液組復(fù)蘇回收率和活力分別為80.75%±4.60%和91.75%±5.42%;自體血漿組復(fù)蘇回收率和活力分別為81.55%±4.50%和92.65%±4.92%,組間差異無統(tǒng)計學意義。復(fù)蘇后CD34+細胞占1.25%±0.70%,集落形成總數(shù)為(32.10±29.60)/105。結(jié)論:兩步法分離臍血單個核細胞的回收率高于一步法,兩種保護液的保護效果無顯著差異。
【作者單位】： 吉林省銀豐生物工程技術(shù)有限公司;吉林大學第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 臍血單個核細胞 分離 Ficoll密度梯度離心法 AXP系統(tǒng)兩步法制備 低溫冷凍保存 復(fù)蘇回收率
【分類號】：R329.2
【正文快照】：

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