本文關(guān)鍵詞：臍血單個(gè)核細(xì)胞分離方法的比較研究

  更多相關(guān)文章： 臍血單個(gè)核細(xì)胞 分離 Ficoll密度梯度離心法 AXP系統(tǒng)兩步法制備 低溫冷凍保存 復(fù)蘇回收率

【摘要】：目的:探討臍血單個(gè)核細(xì)胞的提取、凍存及復(fù)蘇工藝,實(shí)現(xiàn)臍血單個(gè)核細(xì)胞的長(zhǎng)久保存。方法:采集足月妊娠者臍血40~180ml,運(yùn)用Ficoll密度梯度離心法和AXP臍帶血自動(dòng)分離系統(tǒng)與Ficoll密度梯度離心法兩步法分離臍血單個(gè)核細(xì)胞,采用非程控降溫法降溫,將細(xì)胞保存于-196℃液氮中。比較分析不同分離方法分離人臍血單個(gè)核細(xì)胞的細(xì)胞得率及活力;冷凍保護(hù)液配制分2組:無(wú)血清培養(yǎng)液+10%DMSO+10%右旋糖酐和自體血漿+10%DMSO+10%右旋糖酐,根據(jù)凍存時(shí)間進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,分析其凍存前后的細(xì)胞活力、單個(gè)核細(xì)胞回收率、CD34+細(xì)胞數(shù)和CFU形成能力。結(jié)果:Ficoll密度梯度離心后獲得的臍血單個(gè)核細(xì)胞活力為99.70%±0.30%,回收率為54.40%±4.52%;兩步法分離臍血單個(gè)核細(xì)胞活力為99.60%±0.40%,回收率為62.12%±3.78%,2組回收率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。凍存6、12、24個(gè)月后,各時(shí)間點(diǎn)單個(gè)核細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)液組復(fù)蘇回收率和活力分別為80.75%±4.60%和91.75%±5.42%;自體血漿組復(fù)蘇回收率和活力分別為81.55%±4.50%和92.65%±4.92%,組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。復(fù)蘇后CD34+細(xì)胞占1.25%±0.70%,集落形成總數(shù)為(32.10±29.60)/105。結(jié)論:兩步法分離臍血單個(gè)核細(xì)胞的回收率高于一步法,兩種保護(hù)液的保護(hù)效果無(wú)顯著差異。
【作者單位】： 吉林省銀豐生物工程技術(shù)有限公司;吉林大學(xué)第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 臍血單個(gè)核細(xì)胞 分離 Ficoll密度梯度離心法 AXP系統(tǒng)兩步法制備 低溫冷凍保存 復(fù)蘇回收率
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】：

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 郭繼強(qiáng);劉愛(ài)兵;沈丹;;兩步法分離人臍血單個(gè)核細(xì)胞的最佳條件[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年45期

2 孫海梅;季鳳清;李榮平;王屹;曾曉蓓;張立新;;不同培養(yǎng)條件下人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的差異[J];中國(guó)臨床康復(fù);2006年45期

3 遲作華;張洹;何冬梅;陸琰;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2006年05期

4 蘭炯采,劉忠,甘茂州,陳強(qiáng),張印則,孟慶寶;臍血單個(gè)核細(xì)胞的分離及凍存[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2002年04期

5 時(shí)慶;侯懷水;鞠秀麗;李棟;沈柏均;;深低溫凍存十六年后臍血造血干細(xì)胞活性的檢測(cè)[J];中華血液學(xué)雜志;2008年08期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 路春霞;魏本杰;舒暢;楊麗麗;左紅斌;;臍血單個(gè)核細(xì)胞分離方法的比較研究[J];臨床血液學(xué)雜志;2016年04期

2 王宇環(huán);馬飛;付凡;魏宗科;董志瑜;朱利軍;羅曉玲;;外周血液樣本抗凝劑類型、保存時(shí)間和溫度對(duì)CIK細(xì)胞培養(yǎng)的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2016年03期

3 李巍;王曉艷;石玉芬;;Th17/Treg平衡在子癇前期發(fā)病中的變化及IL-21、TGF-β對(duì)其調(diào)節(jié)作用的研究[J];中國(guó)計(jì)劃生育學(xué)雜志;2016年02期

4 史艷利;高嶺;張憲偉;李萌;陳紅兵;;羥乙基淀粉沉降法制備外周血富白細(xì)胞血漿的條件優(yōu)化[J];浙江臨床醫(yī)學(xué);2015年07期

5 徐英;;攜帶人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療肺動(dòng)脈高壓[J];中國(guó)組織工程研究;2015年06期

6 章毅;朱華;金煥英;王引婷;邵夏炎;孔靜思;黃文浩;洪艷;李春麗;高峰;陳亮;王鋒;陸瑤;;液氮凍存時(shí)間對(duì)605份臍血造血干細(xì)胞質(zhì)量和臨床移植效果的影響[J];中華血液學(xué)雜志;2015年01期

7 李麗;趙博;;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療大鼠糖尿病[J];中國(guó)組織工程研究;2014年19期

8 陳琳;謝小燕;劉大慶;呂洋;岳文;師偉;習(xí)佳飛;張秀媛;南雪;王靜雪;周軍年;李艷華;何麗娟;姚海雷;李思婷;裴雪濤;;臍血巨核祖細(xì)胞體外誘導(dǎo)擴(kuò)增的研究[J];中華血液學(xué)雜志;2014年03期

9 張校通;王翔;申重陽(yáng);趙令卉;王小燕;張清友;尹珊珊;陳靜嫻;張蓉;鄭榆坤;;一種簡(jiǎn)便提取臍帶血單個(gè)核細(xì)胞的方法[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年13期

10 銀廣悅;丁俊麗;張繼領(lǐng);;間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)進(jìn)展[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2013年03期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬艷;陳雙;畢曉娟;江明;;羥乙基淀粉一步與兩步法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞及血小板的比較[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年40期

2 張才龍;夏長(zhǎng)所;蔣正堯;;應(yīng)用密度梯度離心和貼壁篩選法分離兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年06期

3 馬力;劉大軍;李德天;劉沛田;邊小慧;;不同分離方法及培養(yǎng)條件對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)增殖及生物學(xué)特性的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年38期

4 段華新;盧光t;程臘梅;;臍血來(lái)源的兩種內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2008年02期

5 張素華;林丹丹;張美娟;陳雪松;徐進(jìn)梅;單昊;吳觀陵;吳�，|;;Ficoll密度梯度離心法分離豬外周血單個(gè)核細(xì)胞條件的探討[J];中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志;2007年03期

6 崔硯;高橋恒夫;;日本臍血庫(kù)和臍血移植的現(xiàn)狀[J];中華血液學(xué)雜志;2006年08期

7 劉素芳;鄢文海;韓雪飛;閻明;邢瑩;;人臍血間充質(zhì)細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法及培養(yǎng)基特性[J];中國(guó)臨床康復(fù);2005年46期

8 向靜,江德鵬,王昌銘,王景周;臍血單個(gè)核細(xì)胞體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)后神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志物mRNA的表達(dá)[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期

9 遲占有,姜華,蔡海波,譚文松,戴干策;羥乙基淀粉沉降法分離臍血過(guò)程的深入分析及條件優(yōu)化[J];中國(guó)輸血雜志;2004年02期

10 龔德華;枸櫞酸三鈉抗凝在血液凈化中的應(yīng)用[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2003年03期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 習(xí)杰英,韓麗,邵文斌,李旭,陳葳,劉娟;臍血單個(gè)核細(xì)胞四種細(xì)胞因子表達(dá)的檢測(cè)[J];中華血液學(xué)雜志;1997年04期

2 向靜;王昌銘;王景周;;臍血單個(gè)核細(xì)胞體外分離和定向分化為神經(jīng)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2007年13期

3 何秋山,毛平,莫文健;臍血單個(gè)核細(xì)胞體外紅系定向擴(kuò)增和分化的研究[J];臨床血液學(xué)雜志;2004年05期

4 師曉東,于載濼,馬瑞英;白細(xì)胞介素2激活的骨髓及臍血單個(gè)核細(xì)胞體外抗腫瘤活性的比較研究[J];中華血液學(xué)雜志;1997年08期

5 黃錫全,孫惠華,聞平,張建峰,王永衛(wèi),楊旭華;pHGF對(duì)CBMC表面標(biāo)志表達(dá)的影響[J];鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年03期

6 劉長(zhǎng)安,張玲,楊光,管增偉,賈廷珍;低劑量輻射對(duì)臍血單個(gè)核細(xì)胞產(chǎn)生IL-2活性的影響[J];中國(guó)微創(chuàng)外科雜志;2001年03期

7 魏曉飛,劉開(kāi)彥;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與臍血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)及PHA誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的抑制[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2004年03期

8 徐莉,康自珍,蔡海波,譚文松;從臍血單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)樹(shù)突狀細(xì)胞[J];華東理工大學(xué)學(xué)報(bào);2002年06期

9 岑洪,林茂芳,蔡真,黃河;臍血單個(gè)核細(xì)胞在間充質(zhì)干細(xì)胞微環(huán)境中向單核細(xì)胞分化[J];中華血液學(xué)雜志;2005年06期

10 徐建萍;卓光生;;PHA-M體外誘導(dǎo)臍血單個(gè)核細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2006年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙向府;史斌;崔建英;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β_1對(duì)臍血單個(gè)核細(xì)胞增殖周期及凋亡的影響[A];第三屆全國(guó)血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

2 王彩霞;毛平;張玉平;鄧婷芬;許艷麗;杜慶華;謝健晉;;臍血單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)研究[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

3 王春芳;李鵬飛;;人臍血單個(gè)核細(xì)胞的體外培養(yǎng)觀察[A];中國(guó)組織工程、干細(xì)胞與神經(jīng)再生學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

4 尹文化;金大地;鄧許勇;魯凱伍;;離心管貼壁細(xì)胞對(duì)人臍血單個(gè)核細(xì)胞體外培養(yǎng)成功率的影響[A];第一屆全國(guó)脊髓損傷治療與康復(fù)研討會(huì)暨中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)脊柱脊髓損傷專業(yè)委員會(huì)脊髓損傷與康復(fù)學(xué)組成立會(huì)論文匯編[C];2009年

5 毛平;王彩霞;林秀梅;杜慶華;;胚胎骨髓基質(zhì)細(xì)胞協(xié)同細(xì)胞因子對(duì)人臍血單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增作用的研究[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

6 趙向府;史斌;崔建英;;混合臍帶血漿對(duì)臍血單個(gè)核細(xì)胞增殖周期及凋亡的影響[A];第三屆全國(guó)血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

7 房家智;張芳婷;汪曉湘;萬(wàn)匯涓;葉靜;龍霞;于潔;;生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)下人臍血單個(gè)核細(xì)胞向肝細(xì)胞的分化[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

8 孫愛(ài)紅;馮四洲;劉斌;韓忠朝;;1NOD/SCID小鼠骨髓腔內(nèi)移植臍血單個(gè)核細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

9 宋振嵐;袁華魏;;臍血單個(gè)核細(xì)胞擴(kuò)增前后的骨髓基質(zhì)植入能力及條件研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 趙文利;陳耀凱;張南;李俊剛;劉國(guó)棟;王宇明;章容;;利用人臍血單個(gè)核細(xì)胞重建急性肝損傷小鼠肝組織的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳喜安;堿性成纖維生長(zhǎng)因子聯(lián)合全反式維甲酸誘導(dǎo)臍血單個(gè)核細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2010年

2 李敏;人臍血單個(gè)核細(xì)胞分離、培養(yǎng)方法的比較[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2008年

3 胡柯;臍血單個(gè)核細(xì)胞靜脈移植對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠缺血再灌注腦損傷治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2009年

4 王宏;體外培養(yǎng)人臍血單個(gè)核細(xì)胞生物學(xué)活性的初步研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

5 段彪;HBV在人臍血單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)的培養(yǎng)研究[D];大理學(xué)院;2012年

6 田清武;深低溫凍存對(duì)臍血單個(gè)核細(xì)胞免疫特性影響的研究[D];青島大學(xué);2005年

7 鄧婷芬;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合細(xì)胞因子支持人臍血單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增的探討[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2009年

8 楊麗樺;人臍血單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)肝樣細(xì)胞的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

9 李文斌;人臍血單個(gè)核細(xì)胞靜脈多次移植對(duì)梗死后心肌膠原網(wǎng)絡(luò)重構(gòu)的影響[D];中南大學(xué);2010年

10 鄭艷;體外聯(lián)合誘導(dǎo)臍血單個(gè)核細(xì)胞向內(nèi)皮樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：809615