基于pH值敏感的熒光染料分析腺病毒誘導(dǎo)T淋巴細胞胞內(nèi)體膜的裂解
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【摘要】:【目的】探索基于pH值敏感的熒光染料分析腺病毒裂解T淋巴細胞胞內(nèi)體膜的實驗方法!痉椒ā勘疚囊訨urkat細胞(T淋巴瘤細胞)為靶細胞,將pH值敏感的熒光染料pHrodo dextran與5型腺病毒(Ad5)共同孵育Jurkat細胞,對pHrodo dextran孵育的濃度與時間進行了優(yōu)化,利用激光共聚焦顯微鏡分析胞內(nèi)相對平均熒光強度百分比隨時間的變化情況,反映Ad5誘導(dǎo)胞內(nèi)體膜裂解情況。【結(jié)果】研究結(jié)果表明,在pHrodo dextran終濃度為80μg/m L,孵育時間為10 min條件下,在病毒感染后的30 min,相對平均熒光強度百分比出現(xiàn)顯著下降;利用巴佛洛酶素A1抑制胞內(nèi)體膜質(zhì)子泵活性后,相對平均熒光強度百分比出現(xiàn)輕微下降。【結(jié)論】建立了基于pHrodo dextran分析腺病毒誘導(dǎo)T細胞胞內(nèi)體膜裂解的新方法。
【作者單位】: 廣東藥科大學生命科學與生物制藥學院廣東省生物技術(shù)候選藥物研究重點實驗室;東莞市人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 腺病毒 胞內(nèi)體 胞內(nèi)運輸 T淋巴細胞
【基金】:國家自然科學基金(31400149,31300737) 廣東省科技計劃項目(2014A020212462) 廣東省自然科學基金(2014A030313586)~~
【分類號】:R392
【正文快照】: T細胞的抗原識別特異性是由其表面的抗原識別受體(T cell receptor,TCR)所決定。體外分離并擴增來自病人的T細胞,利用轉(zhuǎn)基因的方法將具有腫瘤抗原特異性識別的TCR基因轉(zhuǎn)入此T細胞,將能夠賦予T細胞抗腫瘤的能力;然后將此抗原特異性TCR基因修飾T細胞進行過繼性移植/回輸?shù)寞煼?
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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,本文編號:742571
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