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BMP9誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)外成骨分化的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-26 07:11

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【摘要】:目的:探討人骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)在體內(nèi)外誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)成骨分化的作用研究。方法:設(shè)立Ad-BMP9處理組和Ad-GFP對(duì)照組感染h UC-MSCs,兩組細(xì)胞分別于3天、5天、7天進(jìn)行ALP活性檢測(cè),14天后采用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)骨鈣素(Osteocalcin,OCN)、骨橋蛋白(Osteopotin,OPN)的表達(dá)情況,21天后茜素紅染色檢測(cè)礦化結(jié)節(jié)的形成;然后收集不同分組h UCMSC用于裸鼠皮下注射成骨模型的建立,4周后取出離體骨進(jìn)行Micro-CT掃描和分析,并進(jìn)行HE、Masson Trichrome、Alcain Blue染色。結(jié)果:BMP9處理組的ALP活性和礦化結(jié)節(jié)形成明顯高于對(duì)照組,免疫組化染色結(jié)果顯示BMP9誘導(dǎo)組的OCN、OPG的陽性表達(dá)明顯高于對(duì)照組;裸鼠皮下注射成骨模型的觀察結(jié)果顯示,空白對(duì)照組沒有形成肉眼可見的皮下包塊,僅感染AdBMP9的h UC-MSCs能生成異位骨,且形成的異位骨骨量明顯,骨密度平均值為396.05±0.60;HE染色結(jié)果顯示BMP9誘導(dǎo)生成的異位骨中形成部分成熟的骨基質(zhì)和骨小梁,Masson Trichrome染色結(jié)果顯示BMP9明顯誘導(dǎo)h UC-MSCs的基質(zhì)礦化作用,Alcain Blue染色結(jié)果顯示BMP9明顯誘導(dǎo)h UC-MSCs的軟骨內(nèi)成骨作用。結(jié)論:BMP9成功誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的體內(nèi)外成骨作用,為臨床骨組織工程的細(xì)胞療法提供了明確的可行性。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒童發(fā)育疾病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重慶市干細(xì)胞治療工程技術(shù)研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院骨科;重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)中心;
【關(guān)鍵詞】骨形態(tài)形成蛋白 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化
【基金】:重慶市科委自然科學(xué)研究資助項(xiàng)目(cstc2013jcyjA10014)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 骨損傷尤其是骨折是臨床的常見病、多發(fā)病,給患者帶來極大痛苦,因此如何加快骨折愈合、防治骨不連是目前迫切需要解決的問題。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有取材方便、對(duì)供體無傷害、無倫理學(xué)爭(zhēng)議、相對(duì)純凈及免疫原性更低[1]等優(yōu)點(diǎn),我們選擇其作為臨床治療骨缺損疾病的理想種子細(xì)胞

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3 劉元林;于曉Y,

本文編號(hào):740378


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