硫酸軟骨素促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖作用的研究
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【摘要】:目的探討硫酸軟骨素(chondroitin sulfate,CS)對成肌細(xì)胞增殖以及肌管形成的影響。方法取第5代成肌細(xì)胞制成濃度為1×108個/L的細(xì)胞懸液,依據(jù)在成肌細(xì)胞培養(yǎng)基中添加不同濃度CS,將實(shí)驗(yàn)分為A組(0μg/m L)、B組(50μg/m L)、C組(100μg/m L)和D組(200μg/m L)。干預(yù)4、5、8 d于倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化及肌管形成情況,6 d采用MTT法檢測各組細(xì)胞增殖情況,8 d行HE染色檢測各組細(xì)胞肌管形成數(shù)。結(jié)果倒置顯微鏡觀察示,細(xì)胞貼壁后呈單核梭形,細(xì)胞核呈卵圓形,細(xì)胞質(zhì)致密;貼壁90%時(shí)整體肌母細(xì)胞呈漩渦狀走行,長梭狀生長。繼續(xù)培養(yǎng)成肌細(xì)胞細(xì)胞核出現(xiàn)融合現(xiàn)象,形成多核肌管。8 d,A組細(xì)胞多數(shù)已融合形成肌管,B、C組細(xì)胞有部分未融合,D組細(xì)胞融合形成肌管數(shù)最少。MTT檢測示,A、B、C、D組活細(xì)胞吸光度(A)值分別為0.045 2±0.004 4、0.540 4±0.096 7、0.660 9±0.143 4、1.069 0±0.039 0,A組顯著小于B、C、D組,B、C組小于D組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);B、C組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HE染色示,A組細(xì)胞大多數(shù)已融合形成肌管;B、C組有少部分細(xì)胞未融合形成肌管;D組細(xì)胞融合形成肌管數(shù)相對最少,未融合細(xì)胞數(shù)稍多。A、B、C、D組肌管形成數(shù)分別為(222.01±30.02)、(193.13±42.46)、(170.26±11.96)、(136.88±16.78)根,各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.658,P=0.252)。結(jié)論 CS顯著促進(jìn)成肌細(xì)胞增殖,200μg/m L CS促成肌細(xì)胞增殖能力顯著優(yōu)于其他濃度。
【作者單位】: 武警總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心;災(zāi)害救援醫(yī)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;錦州醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 成肌細(xì)胞 肌管 細(xì)胞融合 硫酸軟骨素
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 成肌細(xì)胞是肌肉組織的前體細(xì)胞,來源于衛(wèi)星細(xì)胞,只能單向發(fā)展為肌肉[1],具有自我更新和促進(jìn)肌纖維再生的能力,在彼此天然融合和核傳遞時(shí)產(chǎn)生收縮蛋白,成功應(yīng)用于細(xì)胞治療和基因組治療[2-3]。人成肌細(xì)胞移植治療技術(shù)是通過注射所培養(yǎng)的一定數(shù)量成肌細(xì)胞,使正常人類基因組傳遞至
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