果糖和二硫蘇糖醇對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凍存后活性及多能性的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-08-21 14:33
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【摘要】:背景:凍存是保證干細(xì)胞臨床應(yīng)用的關(guān)鍵步驟之一,但現(xiàn)有凍存技術(shù)常導(dǎo)致細(xì)胞活性降低、多能性喪失及分化能力下降。目的:探究果糖及二硫蘇糖醇是否有助于維持凍存后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞多能性及成骨分化潛能。方法:分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,在細(xì)胞凍存前分別用果糖(200μmol/L),二硫蘇糖醇(500μmol/L)μmol/L)及果糖(200μmol/L)+二硫蘇糖醇(500預(yù)處理1 h。凍存6個(gè)月后,復(fù)蘇細(xì)胞并用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性,定量PCR檢測(cè)相關(guān)干性基因(Nanog,Oct4及Sox2)的表達(dá),堿性磷酸酶活性測(cè)試及茜素紅染色檢測(cè)復(fù)蘇骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化能力。結(jié)果與結(jié)論:(1)復(fù)蘇后各組細(xì)胞在形態(tài)上無明顯差別;(2)果糖預(yù)處理及聯(lián)合預(yù)處理有助于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞活性維持;(3)二硫蘇糖醇預(yù)處理可顯著促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞多能性相關(guān)基因Nanog及Sox2的表達(dá);(4)果糖、二硫蘇糖醇及聯(lián)合預(yù)處理皆有助于維持骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化潛能,但以二硫蘇糖醇及聯(lián)合預(yù)處理組效果最佳;(5)結(jié)果表明,果糖預(yù)處理有助于維持凍存骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞活性,二硫蘇糖醇有助于維持凍存骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞多能性及成骨分化能力。
【作者單位】: 重慶大學(xué)生物工程學(xué)院生物流變科學(xué)與技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 冷凍 果糖 二硫蘇糖醇 組織工程 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞凍存 細(xì)胞活性 多能性 成骨分化 抗氧化
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞屬于中胚層的一類多能干細(xì)胞,在不同理化環(huán)境和細(xì)胞因子的誘導(dǎo)下,可向成骨、軟骨、脂肪和纖維細(xì)胞系等多方向分化[1-2]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有易分離培養(yǎng)和體外擴(kuò)增、免疫原性弱、移植后不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)和不涉及倫理等特點(diǎn),是最具前景
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 梁海曼,林征明;二硫蘇糖醇對(duì)月季莖段培養(yǎng)物發(fā)根的影響[J];云南植物研究;1984年03期
2 ;[J];;年期
,本文編號(hào):713467
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