本文關(guān)鍵詞：弓形蟲(chóng)表面抗原SAG1基因自殺性DNA疫苗的構(gòu)建及免疫原性檢測(cè)

  更多相關(guān)文章： 弓形蟲(chóng) SAG 自殺性DNA疫苗

【摘要】：目的構(gòu)建表達(dá)弓形蟲(chóng)表面抗原SAG1的自殺性DNA疫苗pDREP-SAG1并檢測(cè)其免疫原性。方法以弓形蟲(chóng)RH株基因組DNA為模板,PCR擴(kuò)增SAG1基因(GenBank No.HM776940.1),克隆至甲病毒復(fù)制子載體pDREP-eGFP中替換原有的eGFP基因,菌液PCR、雙酶切及測(cè)序鑒定重組質(zhì)粒。重組的自殺性DNA疫苗pDREP-SAG1經(jīng)股四頭肌注射并聯(lián)合瞬時(shí)電穿孔免疫BALB/c小鼠,同時(shí)以原質(zhì)粒pDREP-eGFP作為對(duì)照組,間隔3周后以相同條件再免疫1次,收集小鼠血清,以弓形蟲(chóng)裂解抗原Western blotting檢測(cè)其誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性抗體。結(jié)果從弓形蟲(chóng)基因組中PCR擴(kuò)增得到1 011bp長(zhǎng)度的SAG1基因,成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pDREP-SAG1。Western blotting結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒免疫的小鼠血清能特異性地識(shí)別蟲(chóng)體抗原中的SAG1抗原。結(jié)論成功構(gòu)建了弓形蟲(chóng)自殺性DNA疫苗pDREP-SAG1,能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生特異性的抗體,具有免疫原性。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院寄生蟲(chóng)學(xué)教研室;溫州醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院/附屬口腔醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲(chóng) SAG 自殺性DNA疫苗
【基金】：浙江省科技廳公益技術(shù)研究社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(No.2014C33161) 溫州市科技局公益項(xiàng)目(No.Y20140665) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃暨新苗人才計(jì)劃項(xiàng)目(No.2015R413061)聯(lián)合資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R382.5
【正文快照】： 浙江省科技廳公益技術(shù)研究社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(No.2014C33161)、溫州市科技局公益項(xiàng)目(No.Y20140665)和浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃暨新苗人才計(jì)劃項(xiàng)目(No.2015R413061)聯(lián)合資助剛地弓形蟲(chóng)(Toxoplasma gondii)是一種重要的機(jī)會(huì)性致病原蟲(chóng),廣泛寄生于人和多種動(dòng)物的有核細(xì)胞內(nèi),可引

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張捷;局部涂抹流感DNA疫苗的保護(hù)作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊(cè);2002年06期

2 趙謹(jǐn) ,王心;DNA疫苗[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;2002年10期

3 韓雙艷,郭勇,楊慧蘭,王捷,楊太成,冼江;新型DNA疫苗的構(gòu)建及其對(duì)小鼠保護(hù)作用的研究[J];激光生物學(xué)報(bào);2004年02期

4 孫波,何苗,楊驊,金晶,滿(mǎn)曉華,龔燕芳,屠振興,杜奕奇,李兆申;攜帶幽門(mén)螺桿菌中性粒細(xì)胞激活蛋白活減毒鼠傷寒沙門(mén)菌口服重組DNA疫苗株的構(gòu)建[J];世界華人消化雜志;2004年06期

5 劉高霞;樊明文;;DNA疫苗的臨床前安全性研究[J];國(guó)際生物制品學(xué)雜志;2006年03期

6 寶福凱;;開(kāi)發(fā)DNA疫苗前景誘人[J];科學(xué)世界;1997年01期

7 向淑利;DNA疫苗與脂質(zhì)體[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2001年07期

8 陳云,石樹(shù)群,楊穎,彭景ii;人絨毛膜促性腺激素β亞基DNA疫苗的構(gòu)建及其抗腫瘤作用的初步研究[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2003年01期

9 唐權(quán);竇駿;趙楓姝;曹明剛;褚莉莉;潘猛;;結(jié)核桿菌抗原85A與小鼠白細(xì)胞介素21共表達(dá)DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效應(yīng)研究[J];生物技術(shù)通訊;2007年01期

10 周智,陳文思,張海紅,姚集魯;重組酵母乙型肝炎疫苗和DNA疫苗交互免疫研究[J];中華肝臟病雜志;2003年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張曉明;焦新安;潘志明;張小榮;劉秀梵;;非抗性篩選DNA疫苗載體及其沙門(mén)氏菌運(yùn)送系統(tǒng)的研制[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2003年

2 王開(kāi)宇;郭瀛軍;張術(shù);王凱慧;陳祖歡;孫樹(shù)漢;;16s rRNA基因探針檢測(cè)DNA疫苗制品中殘留宿主基因組DNA[A];首屆長(zhǎng)三角科技論壇——長(zhǎng)三角生物醫(yī)藥發(fā)展論壇論文集[C];2004年

3 王賓;謝啟發(fā);;DNA疫苗設(shè)計(jì)和研究策略[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)農(nóng)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)分會(huì)第六次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2004年

4 王松;孫梅芹;許誠(chéng);何清;周陶友;陳守春;趙連三;;體內(nèi)外檢測(cè)乙肝DNA疫苗誘生小鼠特異性CTL活性比較研究[A];第一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 姜燕;呂昌龍;單風(fēng)平;徐佳;李成;;Ag85A口服脂質(zhì)體DNA疫苗的制備與初步活性研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

6 陳曉光;馮明釗;龔婭;鄭學(xué)禮;沈樹(shù)滿(mǎn);;適當(dāng)比例的DNA:脂質(zhì)體混合物能顯著增強(qiáng)DNA疫苗的免疫效果[A];中國(guó)原生動(dòng)物學(xué)學(xué)會(huì)第十一次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2001年

7 張馨玉;馬一介;金華利;楊若耶;肖沖;張富春;王賓;;小分子殼聚糖對(duì)DNA疫苗滴鼻和口服免疫的影響[A];2005全國(guó)第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

8 李曉英;王紅寧;唐夢(mèng)君;潘盛;;脂質(zhì)體在DNA疫苗中的作用研究進(jìn)展[A];2005全國(guó)第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

9 郭晨瑩;韓志富;王恒;;納米材料為載體的新型惡性瘧DNA疫苗研究[A];中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)第七屆全國(guó)青年寄生蟲(chóng)學(xué)工作者學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2002年

10 徐金華;鄭志忠;梁俊;張臻;朱乃碩;許炎;;單純皰疹病毒2型多表位復(fù)合DNA疫苗的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;DNA疫苗“餓”殺小鼠腫瘤[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 邱蘇贛;共表達(dá)霍亂毒素B亞基的DNA疫苗的系統(tǒng)及粘膜佐劑活性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 馬曉林;細(xì)胞因子影響鼠卵透明帶3 DNA疫苗免疫不育效果的研究[D];新疆大學(xué);2013年

3 李亮助;對(duì)白血病化療藥物左旋天冬酰胺酶II的熱穩(wěn)定性改造以及微小殘留白血病DNA疫苗的構(gòu)建、純化和免疫效果研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

4 韓雙艷;單純皰疹病毒Ⅱ型DNA疫苗的構(gòu)建及免疫學(xué)性質(zhì)研究[D];華南理工大學(xué);2004年

5 孫靜;DNA疫苗載體優(yōu)化設(shè)計(jì)和新型佐劑的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

6 張雷;嗜肺軍團(tuán)菌雙價(jià)DNA疫苗的初步研究[D];四川大學(xué);2006年

7 卞繼峰;新型雙啟動(dòng)子DNA疫苗載體的研制及在人乳頭瘤病毒疫苗研究中的應(yīng)用[D];山東大學(xué);2003年

8 張衛(wèi)東;甲（A）型流感病毒多基因表達(dá)DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效果研究[D];四川大學(xué);2006年

9 齊蔓莉;沙眼衣原體E型DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效果的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

10 鄭燕;優(yōu)化密碼沙眼衣原體主要外膜蛋白DNA疫苗免疫效果的研究[D];山東大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蔣英;白細(xì)胞介素12對(duì)結(jié)核病DNA疫苗效應(yīng)的增強(qiáng)作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年

2 辛娜;人精子特異性乳酸脫氫酶的原核表達(dá)、DNA疫苗的構(gòu)建及其基因免疫效果的初步鑒定[D];福建醫(yī)科大學(xué);2005年

3 張則強(qiáng);Ⅱ型單純性皰疹病毒DNA疫苗的研究[D];吉林大學(xué);2014年

4 孫利;丙型肝炎病毒DNA疫苗的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 朱曉明;乙肝治療性DNA疫苗工程菌的建立和發(fā)酵培養(yǎng)基的初步優(yōu)化[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

6 王琳;弓形蟲(chóng)棒狀體蛋白R(shí)OP5和ROP7的DNA疫苗免疫小鼠誘導(dǎo)的保護(hù)性研究[D];山東大學(xué);2015年

7 靳小攀;以菌蛻為載體的雙重靶向DNA疫苗的初步研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

8 陳建軍;一次免疫神經(jīng)氨酸酶DNA疫苗抗流感病毒研究[D];湖南師范大學(xué);2005年

9 蘆麗淦;柚皮素及聚乙二醇增強(qiáng)乙肝DNA疫苗免疫效果的研究[D];河南大學(xué);2010年

10 周玉;電擊方法免疫流感病毒DNA疫苗保護(hù)效果研究[D];湖南師范大學(xué);2006年

，

本文編號(hào)：711775