本文關(guān)鍵詞：炎癥性水液代謝障礙動物模型的共性機(jī)制研究

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【摘要】：目的建立急性肺損傷(acute lung injury, ALI)、急性胃潰瘍(acute gastric ulcer,AGU)和慢性腎衰竭(chronic renal failure, CRF)等炎癥性水液代謝障礙動物模型,觀察這三種模型的炎癥因子和水通道蛋白(aquaporins, AQPs)的表達(dá),并用相應(yīng)藥物進(jìn)行干預(yù),探討不同病因炎癥性水液代謝障礙的共性機(jī)制,為炎癥性水液代謝障礙的治療方案和藥物研究提供基礎(chǔ)。方法 取6-8周齡雄性Wistar大鼠,分別采用尾靜脈注射內(nèi)毒素(Lipopolysaccharide,LPS)法、灌服無水乙醇法和灌服腺嘌呤混懸液法建立急性肺損傷、急性胃潰瘍和慢性腎衰竭大鼠模型,各模型均分為3組,即正常對照組、模型對照組、藥物干預(yù)組,藥物干預(yù)組分別用地塞米松、雷尼替丁和醋酸潑尼松進(jìn)行藥物干預(yù)。觀察大鼠體征及精神狀態(tài),檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C反應(yīng)蛋白(CRP)和白介素6(IL-6)等血清炎癥因子；并處死大鼠,分別觀察相應(yīng)靶器官的水腫情況,稱重,取同一部位組織作HE染色和免疫組化染色,進(jìn)行組織病理學(xué)觀察,采用熒光定量PCR和Western Blotting方法檢測靶器官組織中AQPs mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)。結(jié)果 (1) 與正常對照組比較,急性肺損傷模型組大鼠肺指數(shù)明顯升高(p0.05),血清TNF-α、CRP和IL-6含量顯著上升(P0.05)；病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),模型組大鼠肺泡間隔明顯增寬,間質(zhì)內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤,免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)陽性物質(zhì)AQP1、AQP5表達(dá)明顯減少；分子檢測結(jié)果,肺組織AQP1、AQP5 mRNA和蛋白表達(dá)量均有不同程度的降低,其中AQP1 、AQP5 mRNA表達(dá)量呈顯著性差異(P0.05)；地塞米松干預(yù)后大鼠體征和精神狀態(tài)有改善,肺指數(shù)明顯下降(P0.05)、血清TNF-αCRP和IL-6含量均顯著性降低(p0.05),肺組織病理狀況有所改善,肺組織AQP1、AQP5 mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)均顯著上升(p0.05)。 (2)與正常對照組相比,急性胃潰瘍模型組大鼠胃指數(shù)明顯升高(P0.05),血清TNF-α和IL-6含量均顯著升高(P0.05)；胃黏膜較正常組層次模糊,部分黏膜表層呈現(xiàn)缺損,可見炎性細(xì)胞浸潤；免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)陽性物質(zhì)AQP1表達(dá)減少、AQP3表達(dá)增加,而分子檢測發(fā)現(xiàn)胃組織AQP1、AQP3mRNA表達(dá)均有升高趨勢(P0.05),AQP1、AQP3蛋白表達(dá)無明顯變化(P0.05)；雷尼替丁干預(yù)后,大鼠胃指數(shù)明顯下降(P0.05),血清TNF-a和IL-6含量顯著性降低(P0.05)；胃組織病變有明顯改善,未見炎性細(xì)胞浸潤,免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)陽性物質(zhì)AQP1表達(dá)增加、AQP3表達(dá)減少,而分子檢測發(fā)現(xiàn)胃組織AQP3 mRNA、蛋白表達(dá)量呈減少趨勢(P0.05),而AQP1 mRNA和蛋白表達(dá)量有升高趨勢(P0.05)。 (3)慢性腎衰竭模型組大鼠腎指數(shù)明顯升高(P0.05),血清TNF-α、CRP和IL-6含量明顯升高(P0.05),腎小管較正常組擴(kuò)張嚴(yán)重,間質(zhì)內(nèi)可見深色結(jié)晶體并且腎小球破壞嚴(yán)重,周圍組織發(fā)生玻璃樣變,可見炎性細(xì)胞浸潤,免疫組化結(jié)果陽性物質(zhì)AQP1表達(dá)減少、AQP2表達(dá)增加,腎組織AQP1 mRNA、蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05),AQP2蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05),而AQP2 mRNA表達(dá)無明顯變化(P0.05)；醋酸潑尼松干預(yù)后腎指數(shù)和血清CRP含量有下降趨勢(P0.05),大鼠腎小球形態(tài)較清晰完整,免疫組化結(jié)果陽性物質(zhì)AQP1表達(dá)增加、AQP2表達(dá)減少,腎組織AQP1、AQP2的mRNA表達(dá)量及AQP1的蛋白表達(dá)量均顯著升高(P0.05)。結(jié)論(1)三種炎癥性水液代謝障礙模型大鼠靶器官均出現(xiàn)不同程度的水腫現(xiàn)象,且血清炎癥因子TNF-α、CRP和IL-6含量上升,而經(jīng)相應(yīng)藥物干預(yù)后,水腫現(xiàn)象減輕,炎癥因子含量下降； (2)三種驗(yàn)證性水液代謝障礙模型均出現(xiàn)水通道蛋白表達(dá)異常,這可能與各模型大鼠靶器官發(fā)生水液代謝障礙有關(guān),而AQP1表達(dá)水平的降低可能是炎癥性水液代謝障礙疾病的共性之一。
【關(guān)鍵詞】：炎癥 水通道蛋白 水液代謝障礙 Wistar大鼠
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R-332;R363
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 符號說明10-11
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述11-24
• 一、炎癥11-15
• 1 炎癥的基本特征11
• 2 引發(fā)炎癥的原因11-12
• 3 炎癥的基本病理變化12
• 4 炎癥的類型12-13
• 5 常見炎癥性疾病動物模型13
• 6 細(xì)胞因子在炎癥性疾病中作用13-14
• 7 炎癥的主要治療藥物14-15
• 二、水液代謝15-17
• 1 祖國醫(yī)學(xué)對水液代謝的認(rèn)識15
• 2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對水液代謝的認(rèn)識15
• 3 水液代謝障礙及相關(guān)動物模型15-16
• 4 水通道蛋白的相關(guān)研究16-17
• 三、炎癥與水液代謝障礙的關(guān)系17-18
• 參考文獻(xiàn)(References)18-24
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容24-59
• 前言24
• 第一章 急性肺損傷模型的建立及水通道蛋白表達(dá)變化24-40
• 一、實(shí)驗(yàn)材料與方法25-33
• 1 實(shí)驗(yàn)動物與飼養(yǎng)環(huán)境25
• 2 藥物、試劑及配制方法25-27
• 3 主要儀器27-28
• 4 實(shí)驗(yàn)方法28-33
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-38
• 1 一般體征觀察33-34
• 2 主要臟器肉眼觀察及病理學(xué)觀察34-35
• 3 血清炎癥因子含量35-36
• 4 肺組織AQP1、AQP5的mRNA表達(dá)36
• 5 肺AQP1、AQP5蛋白表達(dá)水平36-38
• 三、分析與討論38-40
• 第二章 急性胃潰瘍模型的建立與水通道蛋白表達(dá)變化40-50
• 一、實(shí)驗(yàn)材料與方法40-42
• 1 實(shí)驗(yàn)動物與飼養(yǎng)環(huán)境40
• 2 藥物、試劑及配制方法40-41
• 3 實(shí)驗(yàn)儀器41
• 4 實(shí)驗(yàn)方法41-42
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-48
• 1 一般體征觀察42-43
• 2 主要臟器肉眼觀察及病理學(xué)觀察43-44
• 3 血清炎癥因子含量44-45
• 4 胃組織AQP1、AQP3的mRNA表達(dá)45-46
• 5 胃組織AQP1、AQP3蛋白表達(dá)水平46-48
• 三、分析與討論48-50
• 第三章 慢性腎衰竭模型的建立及水通道蛋白表達(dá)變化50-59
• 一、實(shí)驗(yàn)材料與方法50-52
• 1 實(shí)驗(yàn)動物與飼養(yǎng)環(huán)境50
• 2 藥物、試劑及配制方法50-51
• 3 實(shí)驗(yàn)儀器51
• 4 實(shí)驗(yàn)方法51-52
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果52-58
• 1 一般體征觀察52-53
• 2 主要臟器肉眼觀察及病理學(xué)觀察53-54
• 3 血清炎癥因子含量54-55
• 4 腎組織AQP1、AQP2的mRNA表達(dá)55-56
• 5 腎組織AQP1和AQP2蛋白表達(dá)水平56-58
• 三、分析與結(jié)論58-59
• 討論59-60
• 全文總結(jié)60-61
• 參考文獻(xiàn)(References)61-64
• 致謝64-65
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄65-66

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：704726