本文關鍵詞：胚胎胎SD大鼠神經干細胞原代培養(yǎng)及分化鑒定的實驗研究

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【摘要】：【目的】建立胚胎SD大鼠神經干細胞(neural stem cells,NSCs)原代培養(yǎng)的方法,免疫熒光鑒定其純度和分化潛能�！痉椒ā咳≡�14 d的SD大鼠,麻醉消毒后分離胎鼠大腦海馬組織,研磨并胰酶消化后離心,計數后分瓶培養(yǎng),倒置顯微鏡下觀察神經干細胞生長情況。當神經球直徑100~150μm時,胰酶消化后計數傳代培養(yǎng)。取第3代神經干細胞行巢蛋白免疫熒光染色鑒定其純度。將第3代神經干細胞消化計數后種植于預鋪多聚賴氨酸的培養(yǎng)板中,7 d后行微管相關蛋白2(microtubulinassociated protein 2,MAP2)、膠質纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫熒光染色鑒定其分化潛能�！窘Y果】顯微鏡下可見神經干細胞生長良好,增殖迅速,7 d左右可形成直徑大小為150μm的神經球,細胞透光度好。第3代神經干細胞經免疫熒光染色證實純度95%以上。分化鑒定實驗可見MAP2、GFAP和MBP陽性細胞�！窘Y論】成功建立胚胎SD大鼠神經干細胞原代培養(yǎng)方法,細胞狀態(tài)好、純度高。神經干細胞有多樣分化潛能,可分化為神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞,為神經系統(tǒng)損傷修復和退變性疾病的細胞替代治療提供了實驗基礎。
【作者單位】： 武警后勤學院附屬醫(yī)院腦科醫(yī)院 天津市神經創(chuàng)傷修復重點實驗室;
【關鍵詞】： 神經干細胞 原代培養(yǎng) 免疫熒光 分化
【基金】：國家自然科學基金項目(81301050,81271392,81471275,81401067) 天津市應用基礎與前沿技術研究計劃項目(14JCQNJC10200) 中國博士后基金項目(2013M542583)
【分類號】：R338
【正文快照】： 1992年,Reynolds和Weiss[1]首次成功從成年小鼠紋狀體和海馬分離培養(yǎng)出既能不斷分裂增殖、又有多種分化潛能的細胞,即神經干細胞(neural stemcells,NSCs),打破了神經細胞不能再生的觀念,“神經干細胞”這一概念被正式引入神經科學領域并引發(fā)研究熱潮。NSCs是一群能自我更新并

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本文編號：690945