發(fā)布時(shí)間：2017-08-14 16:41

  本文關(guān)鍵詞：分枝桿菌熱休克蛋白65重組質(zhì)粒的構(gòu)建與原核表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 熱休克蛋白 重組質(zhì)粒 融合蛋白 原核表達(dá) 分枝桿菌

【摘要】：目的研究分枝桿菌熱休克蛋白65(HSP65)重組質(zhì)粒的構(gòu)建與原核表達(dá)。方法 HSP65的開放閱讀框經(jīng)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增后,經(jīng)NcoⅠ與NotⅠ內(nèi)切酶依次酶切,連接至酶切后的原核表達(dá)載體PET-28a中,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL-21中,PCR篩選陽性克隆,并經(jīng)DNA測序進(jìn)一步驗(yàn)證。陽性克隆進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng),并進(jìn)行乳糖誘導(dǎo),十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)菌體蛋白進(jìn)行檢測。結(jié)果成功擴(kuò)增出1 623 bp的目的片段HSP65;測序結(jié)果顯示,該片段與目的序列完全相符,重組子PET-28a/HSP65構(gòu)建成功;乳糖誘導(dǎo)后的HSP65在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)高表達(dá)。結(jié)論分枝桿菌HSP65蛋白的成功表達(dá),為研究其在抗腫瘤疫苗中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 熱休克蛋白 重組質(zhì)粒 融合蛋白 原核表達(dá) 分枝桿菌
【基金】：全國大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(編號(hào):201410472040)
【分類號(hào)】：R378.91
【正文快照】： 研究表明,腫瘤細(xì)胞能表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原或腫瘤特異性抗原,機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別腫瘤抗原產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,引起效應(yīng)細(xì)胞的啟動(dòng)或釋放一系列效應(yīng)分子,攻擊和清除腫瘤細(xì)胞或抑制腫瘤細(xì)胞生長[1]。腫瘤疫苗正是基于這一原理,采取主動(dòng)免疫的方法誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,以達(dá)到預(yù)

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1 徐琛蓉;章錦才;趙川江;張?zhí)N惠;;重組質(zhì)粒PcDNA3.1/sTNFRⅠ在小鼠體內(nèi)表達(dá)的初步研究[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年02期

2 成桂明;楊慧蘭;;pGEX-4T-1/HSV2-gG重組質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2009年09期

3 王斌;質(zhì)粒DNA的構(gòu)型變化對(duì)轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用[J];遺傳學(xué)報(bào);1987年01期

4 張秀華;;重組質(zhì)粒的穩(wěn)定性[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));1991年03期

5 陳飛,吳紅艷,劉艷玲,李莉;蚯蚓溶栓酶重組質(zhì)粒遺傳穩(wěn)定性的研究[J];中醫(yī)藥學(xué)刊;2002年06期

6 馬大偉;陳桂生;杜彥輝;;pGBKT7-hSOD1cDNA重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[J];寧夏醫(yī)學(xué)雜志;2011年06期

7 齊義鵬,黃永秀;昆蟲病毒重組質(zhì)粒的快速提取[J];病毒學(xué)報(bào);1987年02期

8 徐迎佳,何奔,沈南,王彬堯,鄭道聲;人白介素-1β轉(zhuǎn)換酶的克隆及重組質(zhì)粒構(gòu)建[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1999年01期

9 孫念峰;孟慶義;田愛玲;王瑞華;劉兆軒;李博;;重組質(zhì)粒pDsRed1-C1-TRAIL的構(gòu)建及鑒定[J];中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展;2010年11期

10 方瀟碧;張春鴻;黃亞;林森;黃振校;吳麗萍;施清圓;李文峰;廖志蘇;;重組質(zhì)粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a的構(gòu)建與表達(dá)[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2011年12期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 余勝兵;馮艾榮;周平;胡繼明;;一種新的毛細(xì)管電泳動(dòng)態(tài)涂層介質(zhì)在質(zhì)粒DNA分離中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會(huì)第十三屆有機(jī)分析與生物分析學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

2 李夢(mèng)南;任大明;王磊;肖偉;鄭廣宏;;重組質(zhì)粒DNA在熱處理過程中的降解/變性規(guī)律研究[A];上海市化學(xué)化工學(xué)會(huì)2007年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2007年

3 李迪;谷鴻喜;張鳳民;鐘照華;程志;;pQE32-HPV18 L1重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會(huì)成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

4 劉茂軍;張映;邵國青;聶向庭;;重組質(zhì)粒的構(gòu)建、表達(dá)及活性鑒定[A];動(dòng)物生理生化學(xué)分會(huì)第八次學(xué)術(shù)會(huì)議暨全國反芻動(dòng)物營養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

5 寧興旺;謝小兵;朱惠斌;王述湘;葛金文;;α-烯醇化酶重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其表達(dá)形式的研究[A];第一次全國中西醫(yī)結(jié)合檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2014年

6 趙燕;童富淡;;家蠶HMGA(BmHMGA)表達(dá)及功能初步研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2009年

7 徐麗;彭景ii;;重組質(zhì)粒pCR3.1-brZPC'的表達(dá)及其抗生育作用[A];第九次全國生殖生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2003年

8 周珊;徐修禮;馬越云;劉家云;孫怡群;郝曉柯;;HBHA蛋白在結(jié)核病診斷中應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專業(yè)委員會(huì)第六屆全國臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

9 章軍;秦燕;徐虹;陳天圣;樓士林;;利用穿梭表達(dá)重組質(zhì)粒在藍(lán)藻Synechococcus sp.PCC7942中表達(dá)胸腺素α_1[A];中國藻類學(xué)會(huì)第十一次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2001年

10 高方友;楊輝;張治元;何家全;劉仕勇;邱克軍;;重組質(zhì)粒pEGFP-mD1x5的構(gòu)建及其在室管膜前下區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第七屆學(xué)術(shù)交流會(huì)暨神經(jīng)外科學(xué)新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文集[C];2006年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 記者　耿建擴(kuò) 藺玉堂;“表達(dá)凝血八因子新的重組質(zhì)�！背晒ρ兄芠N];光明日?qǐng)?bào);2006年

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1 張泉;重組質(zhì)粒DNA的規(guī)模化生產(chǎn)工藝及質(zhì)量鑒定研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2006年

2 朱鴻飛;重組質(zhì)粒pcDNAKCpG生物安全性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2005年

3 崔福愛;BMP-6和VEGF表達(dá)載體的構(gòu)建及其促進(jìn)成骨作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2010年

4 王席娟;SP-B-C/A(-18)基因多態(tài)性與高氧肺損傷易感性關(guān)系研究[D];華中科技大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 汪小五;肺炎支原體P1-C末端特異性抗原蛋白的制備及其基因分型的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

2 劉加美;組蛋白去乙�；敢种苿㏕SA調(diào)控Keap1-Nrf2信號(hào)通路的相關(guān)機(jī)制研究[D];南京大學(xué);2014年

3 王穎慧;表達(dá)HBsAg基因的重組質(zhì)粒與重組腺病毒的免疫學(xué)初步研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2014年

4 劉原;弓形蟲ROP16的表達(dá)及其調(diào)控宿主細(xì)胞凋亡的研究[D];江蘇大學(xué);2016年

5 李夢(mèng)南;熱處理廢棄重組質(zhì)粒DNA的有效性與安全性分析[D];同濟(jì)大學(xué);2008年

6 李茜;pcDNA3.1-preS1-GFP重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在小鼠精子內(nèi)的表達(dá)[D];青島大學(xué);2010年

7 張戰(zhàn)鋒;細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶2重組質(zhì)粒的構(gòu)建與表達(dá)[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

8 黃麗春;酵母代謝木糖產(chǎn)乙醇重組質(zhì)粒的構(gòu)建[D];廈門大學(xué);2009年

9 劉陽;剛地弓形蟲HSP70基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其誘導(dǎo)小鼠的細(xì)胞免疫應(yīng)答[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 楊媚娜;β轉(zhuǎn)化生長因子受體Ⅱ啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建[D];吉林大學(xué);2012年

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