本文關(guān)鍵詞：大鼠ASC體外分離培養(yǎng)、鑒定及其雙報告基因標(biāo)記示蹤

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【摘要】：[目的]探索ASC高效分離方法,采用熒光基因標(biāo)記法對分離的ASC進(jìn)行標(biāo)記、功能檢測和示蹤研究。[方法]通過優(yōu)化脂肪組織的酶解消化條件,分別采用膠原酶、胰蛋白酶及組合對脂肪組織消化,檢測細(xì)胞產(chǎn)量,并用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行鑒定。之后利用GFP-Fluc雙報告基因?qū)w外分離培養(yǎng)的ASC進(jìn)行標(biāo)記,鑒定其多項分化潛能。[結(jié)果]膠原酶、胰蛋白酶復(fù)合酶消化能夠顯著提高ASC分離效率,細(xì)胞產(chǎn)量較單一酶消化提高4~5倍。體外擴(kuò)增培養(yǎng)ASC以表達(dá)CD29、CD90等為主。GFP-Fluc基因標(biāo)記后的ASCs具有成脂肪、成骨分化潛能,可用于活體干細(xì)胞移植后的定量追蹤。[結(jié)論]膠原酶、胰蛋白酶復(fù)合酶解法可以顯著提高脂肪干細(xì)胞的原代分離效率4~5倍。
【作者單位】： 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院;佳木斯市第十九中學(xué);黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪來源的干細(xì)胞(ASC) 組織工程與再生醫(yī)學(xué) 生物發(fā)光 復(fù)合酶解法
【基金】：黑龍江省中醫(yī)管理局科研項目(“二妙散對銀屑病樣小鼠的治療作用及機(jī)制研究”,No.zhy12_w016)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 脂肪來源干細(xì)胞(ASC)已被證實在組織修復(fù)與再生中有著廣闊的應(yīng)用前景和治療潛能[1]。在臨床治療應(yīng)用中,盡管所需要ASC細(xì)胞數(shù)量可以通過大量的抽取脂肪組織或體外長期擴(kuò)增來獲得,然而大量的抽脂同樣會伴隨較大的侵襲性;不僅如此,ASC體外的長期培養(yǎng)會增加ADSC基因型突變以及致瘤

【相似文獻(xiàn)】

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1 馬巧玉,王宇明,郝飛,劉國棟;體外分離培養(yǎng)正常成人肝細(xì)胞的方法[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2001年02期

2 李蘭蘭;陳玲肖;馬炬明;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2014年01期

3 韓立赤,胡靜,戚孟春,鄒淑娟,王大章;大鼠骨髓MSCs體外分離培養(yǎng)及多向分化的實驗研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2004年02期

4 卞林,惠國楨,陸華,蔣云召,苗宗寧,蔣震偉;人胚中腦神經(jīng)干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)及分化的研究[J];江蘇醫(yī)藥;2004年05期

5 熊曦州;李曉紅;姚天華;饒國洲;石建峰;李昂;;大鼠MSCs體外分離培養(yǎng)及骨向分化的實驗研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2006年04期

6 范斌;余冰;田剛;張凱;劉漢中;;新生家兔空腸上皮細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)與鑒定[J];動物營養(yǎng)學(xué)報;2014年06期

7 艾國平,粟永萍,閆國和,冉新澤,劉曉宏,羅成基,程天民;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2001年05期

8 ;[J];;年期

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1 周佳;兔陰道粘膜上皮細(xì)胞體外分離培養(yǎng)實驗研究[D];江西醫(yī)學(xué)院;2005年

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