本文關(guān)鍵詞：大鼠ASC體外分離培養(yǎng)、鑒定及其雙報(bào)告基因標(biāo)記示蹤

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【摘要】：[目的]探索ASC高效分離方法,采用熒光基因標(biāo)記法對(duì)分離的ASC進(jìn)行標(biāo)記、功能檢測(cè)和示蹤研究。[方法]通過(guò)優(yōu)化脂肪組織的酶解消化條件,分別采用膠原酶、胰蛋白酶及組合對(duì)脂肪組織消化,檢測(cè)細(xì)胞產(chǎn)量,并用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行鑒定。之后利用GFP-Fluc雙報(bào)告基因?qū)w外分離培養(yǎng)的ASC進(jìn)行標(biāo)記,鑒定其多項(xiàng)分化潛能。[結(jié)果]膠原酶、胰蛋白酶復(fù)合酶消化能夠顯著提高ASC分離效率,細(xì)胞產(chǎn)量較單一酶消化提高4~5倍。體外擴(kuò)增培養(yǎng)ASC以表達(dá)CD29、CD90等為主。GFP-Fluc基因標(biāo)記后的ASCs具有成脂肪、成骨分化潛能,可用于活體干細(xì)胞移植后的定量追蹤。[結(jié)論]膠原酶、胰蛋白酶復(fù)合酶解法可以顯著提高脂肪干細(xì)胞的原代分離效率4~5倍。
【作者單位】： 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院;佳木斯市第十九中學(xué);黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪來(lái)源的干細(xì)胞(ASC) 組織工程與再生醫(yī)學(xué) 生物發(fā)光 復(fù)合酶解法
【基金】：黑龍江省中醫(yī)管理局科研項(xiàng)目(“二妙散對(duì)銀屑病樣小鼠的治療作用及機(jī)制研究”,No.zhy12_w016)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 脂肪來(lái)源干細(xì)胞(ASC)已被證實(shí)在組織修復(fù)與再生中有著廣闊的應(yīng)用前景和治療潛能[1]。在臨床治療應(yīng)用中,盡管所需要ASC細(xì)胞數(shù)量可以通過(guò)大量的抽取脂肪組織或體外長(zhǎng)期擴(kuò)增來(lái)獲得,然而大量的抽脂同樣會(huì)伴隨較大的侵襲性;不僅如此,ASC體外的長(zhǎng)期培養(yǎng)會(huì)增加ADSC基因型突變以及致瘤

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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本文編號(hào)：644123