本文關(guān)鍵詞：MSX2對人胎盤滋養(yǎng)層細胞侵襲能力的影響及機理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:成功的胚胎植入取決于滋養(yǎng)層細胞的正常分化和適度侵襲。滋養(yǎng)層侵襲不足將導(dǎo)致妊娠相關(guān)疾病,如早期流產(chǎn)、先兆子癇等。MSX2(Msh Homeobox 2),MSX同源框蛋白家族的一個成員,在哺乳動物的許多細胞和組織,如牙齒、軟骨,和許多外胚層器官的生長和分化過程中充當著關(guān)鍵角色。最近的研究發(fā)現(xiàn),MSX2可以通過激活癌細胞的EMT進程,進而促進其向臨近組織侵襲及遷移。然而,MSX2在胎盤滋養(yǎng)層的侵襲行為中是否扮演角色,還有待探索。目的:以不同時期人胎盤絨毛組織及人滋養(yǎng)層細胞系作為研究對象,研究MSX2對人胎盤滋養(yǎng)層細胞侵襲行為的影響及其機制。方法:1.用免疫組織化學方法檢測MSX2在不同時期的人胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞的表達。2.用Western Blotting方法檢測MSX2在HTR8/SVneo,JEG-3,JAR和BeWo四種人滋養(yǎng)層細胞中的表達。3.對人正常滋養(yǎng)層細胞系HTR8/SVneo轉(zhuǎn)染MSX2過表達質(zhì)�；蛱禺愋缘腗SX2-si RNA后,運用細胞侵襲實驗(Matrigel invasion assay)檢測MSX2對滋養(yǎng)層細胞侵襲能力的影響,隨后收集上清液和細胞,分別用明膠酶譜法和Western Blotting方法檢測基質(zhì)金屬蛋白酶Pro-MMP-2,-9和MMP-2,-9的表達。4.在正常滋養(yǎng)層細胞系HTR8/SVneo及絨毛膜癌細胞系JEG-3中過表達或干擾MSX2后,收集細胞RNA或者蛋白,用qRT-PCR和(或)Western Blotting方法檢測與EMT及侵襲相關(guān)因子E-cadherin,vimentin和β-catenin的表達。5.用免疫組織化學及Western Blotting方法對比檢測MSX2在人正常足月胎盤和先兆子癇胎盤滋養(yǎng)層細胞中的表達。結(jié)果:1.MSX2蛋白表達在整個妊娠時期人胎盤的細胞滋養(yǎng)層,合胞體滋養(yǎng)層和絨毛外滋養(yǎng)層細胞中,且在HTR8/SVneo,JEG-3,JAR和BeWo四種人滋養(yǎng)層細胞中也均有表達。2.HTR8/SVneo細胞轉(zhuǎn)染MSX2過表達質(zhì)粒后,該細胞在體外的侵襲能力得到了提升(271±45vs.443±75,P0.05),并且伴隨著基質(zhì)金屬酶-2(MMP-2),vimentin和β-catenin的表達升高(P0.05)。轉(zhuǎn)染MSX2-siRNA后,結(jié)果與之相反。然而,不管是轉(zhuǎn)染MSX2過表達質(zhì)粒還是MSX2-siRNA,都只影響β-catenin的蛋白水平,而不影響其mRNA水平。同時,在JEG-3細胞中過表達MSX2,導(dǎo)致E-cadherin的表達降低(P0.05),而轉(zhuǎn)染MSX2-si RNA,導(dǎo)致E-cadherin的表達升高(P0.05)。3.在人先兆子癇胎盤絨毛中,MSX2的蛋白表達水平比正常足月胎盤顯著降低(P0.05)。結(jié)論:MSX2能增強人滋養(yǎng)細胞的侵襲能力,其可能機制是通過激活經(jīng)典Wnt信號進而促進EMT,且MSX2表達的異�？赡芘c先兆子癇的發(fā)生相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：MSX2 滋養(yǎng)層細胞 侵襲 EMT 先兆子癇
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R321
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 第一部分 MSX2在不同時期人胎盤絨毛及不同人滋養(yǎng)層細胞系的表達13-20
• 1 材料與方法13-16
• 2 實驗結(jié)果16-20
• 第二部分 MSX2對人正常滋養(yǎng)層細胞系HTR8/SVneo侵襲能力的影響20-38
• 1 材料和方法20-25
• 2 實驗結(jié)果25-38
• 第三部分 MSX2在先兆子癇胎盤和正常胎盤中的表達對比38-41
• 1 材料和方法38
• 2 實驗結(jié)果38-41
• 討論41-44
• 全文總結(jié)44-45
• 附件45-47
• 參考文獻47-51
• 文獻綜述51-60
• 參考文獻56-60
• 致謝60-61
• 攻讀學位期間的研究成果及發(fā)表的學位論文目錄61

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本文編號：464943