本文關(guān)鍵詞：蛋白激酶A抑制劑H-89通過調(diào)節(jié)核糖體蛋白S6激酶1的磷酸化阻斷SP600125誘導(dǎo)的CMK細(xì)胞多倍體化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究核糖體蛋白S6激酶1(S6K1)翻譯后修飾在巨核細(xì)胞倍體化調(diào)控方面的作用。方法 c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制劑SP600125和蛋白激酶A(PKA)抑制劑H-89單獨(dú)或聯(lián)合處理CMK原始巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞。碘化丙啶(PI)染色,結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測DNA的相對量,從而進(jìn)行DNA倍體分析;Western blot法檢測哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)下游靶分子S6K1表達(dá)和磷酸化修飾(Thr389和Thr421/Ser424)的變化。使用分子對接和激酶活性檢測分析H-89與S6K1結(jié)合的關(guān)系以及對激酶活性的影響。結(jié)果 SP600125以時(shí)間和劑量依賴的方式誘導(dǎo)CMK細(xì)胞多倍體化,同時(shí),上調(diào)S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和下調(diào)Thr389的磷酸化。H-89不但部分阻斷SP600125誘導(dǎo)CMK細(xì)胞多倍體化,而且下調(diào)S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和上調(diào)Thr389磷酸化。分子對接和激酶活性分析發(fā)現(xiàn)H-89通過占據(jù)ATP結(jié)合位點(diǎn),抑制S6K1活性。值得注意的是,H-89和SP600125均抑制PKA的活性,而且兩者聯(lián)合進(jìn)一步抑制了PKA的活性,表明H-89阻斷SP600125誘導(dǎo)CMK多倍體化與其對PKA的作用無關(guān),而與S6K1磷酸化修飾狀態(tài)的改變有關(guān)。結(jié)論 H-89通過調(diào)節(jié)S6K1磷酸化阻斷SP600125誘導(dǎo)CMK細(xì)胞多倍體化。
【作者單位】： 沈陽軍區(qū)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 核糖體蛋白S激酶(SK) 巨核細(xì)胞 多倍體化
【基金】：國家自然科學(xué)基金(61302003,31571398)
【分類號】：R392
【正文快照】： 巨核細(xì)胞由造血細(xì)胞干細(xì)胞產(chǎn)生,并經(jīng)有絲分裂向核內(nèi)有絲分裂的轉(zhuǎn)換,產(chǎn)生體積巨大多分葉核的多倍性細(xì)胞[1-3]。然而,有絲分裂向核內(nèi)有絲分裂轉(zhuǎn)換的機(jī)制目前尚不清楚。我們以往的研究發(fā)現(xiàn),哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)下游重要靶分子核糖體蛋白

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本文編號：436107