本文關(guān)鍵詞：啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)低濃度過(guò)氧化氫激活神經(jīng)肽PACAP特異受體PAC1-R啟動(dòng)子的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：垂體腺苷酸環(huán)化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)特異受體PAC1-R(PACAP receptor 1)是神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物開(kāi)發(fā)的重要靶點(diǎn)。為了研究其表達(dá)的生物學(xué)機(jī)制,本研究克隆了PAC1-R基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游從-2 500到+26的2 526 bp啟動(dòng)子片段,構(gòu)建PAC1-R啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的熒光素酶基因報(bào)告載體p GL3-PAC1-Rp,并確證PAC1-R啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)在小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞Neuro-2a和人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y中工作正常。運(yùn)用此PAC1-R啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告系統(tǒng),首次發(fā)現(xiàn)低濃度過(guò)氧化氫(hydrogen peroxide,H_2O_2)有效激活PAC1-R啟動(dòng)子,此作用可被轉(zhuǎn)錄因子特化蛋白1(specificity protein 1,SP1)抑制劑光神霉素A(mithramycin A)所抑制,提示SP1參與介導(dǎo)H_2O_2對(duì)PAC1-R啟動(dòng)子的激活作用。生物信息學(xué)分析顯示,PAC1-R啟動(dòng)子含有多個(gè)SP1結(jié)合位點(diǎn)。PAC1-R啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)的構(gòu)建為深入探索PAC1-R高表達(dá)的作用與機(jī)制奠定了基礎(chǔ),低濃度H_2O_2對(duì)PAC1-R啟動(dòng)子激活作用的發(fā)現(xiàn)有助于深入詮釋低濃度活性氧的生理學(xué)作用。
【作者單位】： 暨南大學(xué)生物醫(yī)藥研究院;
【關(guān)鍵詞】： PACAP受體 啟動(dòng)子 熒光素酶報(bào)告系統(tǒng) 過(guò)氧化氫(HO) 特化蛋白(SP)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31100545) 廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.2016A030313087)資助~~
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： *聯(lián)系人Tel:020-38896770;E-mail:tyrj@jnu.edu.cnReceived:May 10,2016;Revised:June 14,2016;Accepted:June 16,2016Supported by National Natural Science Foundation of China(No.30471975);Natural Science Foundation of Guangdong Province(No.2016A030313087)*Corres

  本文關(guān)鍵詞：啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)低濃度過(guò)氧化氫激活神經(jīng)肽PACAP特異受體PAC1-R啟動(dòng)子的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：427873