布魯氏菌非編碼小RNA BSR1526突變株與過表達(dá)株的構(gòu)建及毒力研究
發(fā)布時(shí)間:2017-06-04 10:21
本文關(guān)鍵詞:布魯氏菌非編碼小RNA BSR1526突變株與過表達(dá)株的構(gòu)建及毒力研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的為探討非編碼小RNA BSR1526在布魯氏菌胞內(nèi)生存中的作用,構(gòu)建BSR1526突變株與過表達(dá)株并分析它們在模擬胞內(nèi)環(huán)境和小鼠體內(nèi)的存活能力。方法首先采用Northern blot和RT-PCR驗(yàn)證布魯氏菌16M在體外刺激條件中BSR1526的轉(zhuǎn)錄;然后采用融合PCR構(gòu)建BSR1526缺失株;將BSR1526插入到質(zhì)粒pBBR1-MCS4中,電轉(zhuǎn)入16M中構(gòu)建過表達(dá)株16M-BSR1526;最后分析BSR1526缺失株和過表達(dá)株在模擬胞內(nèi)環(huán)境以及小鼠體內(nèi)的存活力。結(jié)果 BSR1526在布魯氏菌16M中存在轉(zhuǎn)錄,且在不同刺激條件下轉(zhuǎn)錄水平不同。BSR1526缺失或過表達(dá)影響了布魯氏菌16M在體外的生長能力,缺失后在熱應(yīng)激、氧化壓力及酸性環(huán)境下的生存能力下降,在小鼠脾臟內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量顯著下降,表明BSR1526影響了布魯氏菌的毒力。結(jié)論非編碼小RNA BSR1526影響著布魯氏菌16M在胞內(nèi)生存能力,缺失BSR1526后布魯氏菌16M抵抗外界不良環(huán)境的能力下降,同時(shí)在小鼠體內(nèi)的毒力下降。
【作者單位】: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院動(dòng)物疫病與人類健康四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;成都農(nóng)業(yè)科技職業(yè)學(xué)院;武警總醫(yī)院檢驗(yàn)科;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 布魯氏菌 非編碼小RNA BSR 胞內(nèi)生存
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31000548) 成都大熊貓繁育研究基金會項(xiàng)目(No.CPF2015-4) 北京市自然基金(No.6122030) 北京市科技新星資助項(xiàng)目(No.Z131102000413062)聯(lián)合資助~~
【分類號】:R378.2
【正文快照】: 細(xì)菌非編碼小RNA(Small non-coding RNA,sRNA)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類RNA調(diào)控子,不編碼蛋白質(zhì),長度在50~500個(gè)核苷酸之間[1]。過去它們被認(rèn)為是“垃圾RNA”,但隨著研究的深入,發(fā)現(xiàn)RNA的突變或異常表達(dá)與許多疾病的發(fā)生密切相關(guān)。sRNA廣泛參與了生物生命活動(dòng)的調(diào)控[2]。目前認(rèn)為,細(xì)
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本文編號:420736
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