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SETD4基因敲除小鼠的構(gòu)建及鑒定

發(fā)布時間:2017-06-03 20:14

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【摘要】:目的構(gòu)建并鑒定SETD4基因敲除小鼠,為研究SETD4的生物學(xué)功能提供動物模型。方法將引進的SETD4flox/+小鼠與EIIa-Cre小鼠進行雜交繁殖,得到基因型為SETD4+/-.EIIa-Cre的小鼠;再與C57BL/6小鼠雜交去除Cre酶,獲得雜合子SETD4+/-小鼠;該小鼠自交獲得純合子SETD4-/-小鼠。通過PCR法鑒定子代小鼠的基因型;RT-PCR、熒光定量PCR方法鑒定純合子的SETD4基因敲除小鼠SETD4m RNA表達情況;HE染色觀察小鼠肝、肺組織的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果 PCR結(jié)果表明子代小鼠的基因型符合SETD4-/-;純合子基因敲除小鼠SETD4 m RNA水平顯著低于野生型小鼠;SETD4基因敲除小鼠肝、肺組織的形態(tài)學(xué)特征與野生型小鼠相比無明顯差異。結(jié)論本研究基于Cre/loxp系統(tǒng),成功構(gòu)建并鑒定了SETD4基因敲除小鼠。
【作者單位】: 廣東省蛋白質(zhì)組學(xué)重點實驗室南方醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】SETD 基因敲除 Cre/loxp系統(tǒng) KO-First技術(shù)
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(No.81072425,No.81471901) 廣東省自然科學(xué)基金重點項目(2015A030311031)
【分類號】:R3416
【正文快照】: 黃穗,黃夢怡,鐘s檒,

本文編號:419134

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