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新型布尼亞病毒環(huán)介導等溫擴增可視化檢測方法的建立

發(fā)布時間:2017-06-03 15:17

  本文關鍵詞:新型布尼亞病毒環(huán)介導等溫擴增可視化檢測方法的建立,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的應用環(huán)介導等溫擴增(LAMP)技術建立新型布尼亞病毒(SFTSV)可視化快速檢測方法。方法針對新型布尼亞病毒的S片段基因設計LAMP引物建立LAMP方法。反應體系內(nèi)加入染料羥基萘酚藍(HNB)作為反應擴增指示劑,根據(jù)LAMP濁度儀擴增結果優(yōu)化反應條件,根據(jù)HNB顏色變化進行結果判定,評估LAMP方法的特異性和靈敏性。結果建立的LAMP方法最低檢出限為10拷貝/反應管;方法的特異性高,僅SFTSV反應管顏色由紫羅蘭變?yōu)樘焖{色,而漢坦病毒、新疆出血熱、Q熱、馬爾堡、埃博拉病毒及陰性對照反應管均未發(fā)生變色反應;LAMP反應的最佳溫度為63℃,其擴增效率高于常規(guī)PCR,試驗過程僅需30min。結論建立的可視化SFTSV LAMP檢測方法具有特異性強,靈敏性高,實驗設備要求簡單等優(yōu)點,可用于SFTSV的快速檢測。
【作者單位】: 南京軍區(qū)疾病預防控制中心;
【關鍵詞】新型布尼亞病毒(SFTSV) 可視化檢測 環(huán)介導等溫擴增(LAMP) 羥基萘酚藍(HNB)
【基金】:國家重大傳染病專項課題(No.20013ZX10004-008;2013ZX10001001-004) 全軍青年培育項目(No.13QNP051) 江蘇省科技支撐計劃(社會發(fā)展)項目(No.BE2012609)
【分類號】:R373
【正文快照】: ***2009年的“蜱蟲叮咬人致死事件”引起社會廣泛關注,其病原體最終確定為布尼亞病毒科白蛉病毒屬的一種新病毒,命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒(severe fever with thrombocytopenia syndromebunyavirus,SFTSV)[1],該病多發(fā)生于丘陵地帶,主要傳播途徑為蜱蟲叮咬,臨床

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本文編號:418515

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