目的：構(gòu)建重組厭氧芽胞梭菌saccharobutylicumβ-1,4葡聚糖內(nèi)切酶啟動子及信號肽(eglAp)-人表皮生長因子受體2胞外區(qū)(hHer2/neu ECD)-人白細胞介素12(rhIL12)融合基因穿梭表達載體(pIMPleglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12),為進一步制備eglAp-hHer2/neu-rhIL 12融合基因修飾的重組厭氧芽胞梭菌,進行Her2/neu陽性實體腫瘤基因治療的研究奠定基礎(chǔ)。 方法：①以含有全長hHer2/neu序列的真核表達質(zhì)粒(pcDNA3.1 hHer2/neu)為模板,采用PCR方法,擴增hHer2/neu ECD基因片段(1896bp),通過酶切連接的方法,將其插入重組rhIL12真核表達質(zhì)粒pcDNA6 rhIL12 (p1)中的rhIL12基因上游,獲得pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL 12 (p2)真核表達質(zhì)粒。②設(shè)計合成eglAp基因中一段55bp序列作為模板,通過連續(xù)PCR的方法,擴增eglAp基因片段(335bp),并構(gòu)建T-eglAp(p3)亞克隆質(zhì)粒。③通過酶切連接的方法,將eglA...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
第二章 結(jié)果
    2.1 hHer2/neu ECD基因的擴增和pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL12質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定
    2.2 eglAp基因的獲取及T-eglAp業(yè)克隆載體的構(gòu)建
    2.3 pcDNA6 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建
    2.4 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12融合基因的擴增及重組pIMP1eglAp-hHer2/neuECD-rhIL12融合基因穿梭表達載體的構(gòu)建及鑒定
第三章 討論
第四章 小結(jié)
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號：4049441