目的:建立一種簡便的分離與鑒定胚胎小鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的方法。方法:分離14～16 d胚胎小鼠腸道組織,制備單細(xì)胞懸液,用神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生長專用的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),在倒置顯微鏡下觀察膠質(zhì)細(xì)胞的生長情況。在細(xì)胞貼壁達(dá)90%以上時進(jìn)行純化并傳代,待細(xì)胞貼壁后使用GFAP、S100b和Sox10蛋白抗體作為膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)記物用免疫熒光法進(jìn)行EGCs純度的鑒定。結(jié)果:培養(yǎng)24 h部分細(xì)胞貼壁,隨培養(yǎng)天數(shù)延長貼壁細(xì)胞的數(shù)量逐漸增多,胞體較前飽滿,突起進(jìn)一步向外延展。12～14 d時細(xì)胞貼壁達(dá)90%以上,傳代后細(xì)胞狀態(tài)良好。免疫熒光染色可見其GFAP、S100b和Sox10蛋白質(zhì)染色陽性率均達(dá)90%以上,鑒定為腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。結(jié)論:我們建立了一種簡便的分離與鑒定胚胎小鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的方法,今后可以用于EGCs自身功能及與其他腸道細(xì)胞相互作用的研究。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        1.1 主要試劑及儀器
        1.2 動物
    2 方法
        2.1 玻片的包被
        2.2 胚胎小鼠腸道細(xì)胞分離
        2.3 EGCs的接種與培養(yǎng)
        2.4 EGCs的純化
        2.5 EGC的形態(tài)觀察與鑒定
            2.5.1 形態(tài)觀察
            2.5.2 鑒定
        2.6 細(xì)胞免疫熒光染色法
結(jié)果
    1 EGCs形態(tài)隨時間的變化
    2胚胎小鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞純度鑒定
討論



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