人腫瘤壞死因子α特異性結(jié)合miR-146b的新生物學特性研究
發(fā)布時間:2017-05-28 10:11
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【摘要】:目的:探討人腫瘤壞死因子α(TNF-α)作為micro RNA(mi RNA)結(jié)合蛋白的生物學特性。方法:Western印跡檢測LPS激活的U937細胞中TNF-α蛋白表達水平,RT-PCR檢測幾種炎癥相關(guān)的mi RNA在激活前后表達水平的變化;用RNA結(jié)合蛋白免疫共沉淀(RIP)技術(shù)釣取U937細胞中TNF-α結(jié)合的mi RNA,RT-PCR檢測RIP產(chǎn)物中上述幾種mi RNA的含量;用凝膠阻滯實驗檢測TNF-α與mi RNA是否直接結(jié)合。結(jié)果:LPS激活的U937細胞中能檢測到膜結(jié)合型和可溶性2種形式的TNF-α,細胞激活前后mi R-16和mi R-21的表達水平在檢測的幾種mi RNA中最高,mi R-146b和mi R155次之;而RIP產(chǎn)物中mi R-146b的水平在實驗組和對照組中有顯著差異,其他mi RNA差異不明顯;凝膠阻滯實驗結(jié)果顯示mi R-146b能與人TNF-α直接結(jié)合。結(jié)論:首次證實人TNF-α能夠直接特異地結(jié)合mi R-146b,提示TNF-α可能作為mi RNA結(jié)合蛋白發(fā)揮生物學功能。
【作者單位】: 廣西醫(yī)科大學;軍事醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所;
【關(guān)鍵詞】: 人腫瘤壞死因子α microRNA RNA結(jié)合蛋白 RNA結(jié)合蛋白免疫共沉淀
【基金】:國家自然科學基金(31570817,31370794)
【分類號】:R3416
【正文快照】: 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)是一種重要的細胞因子,主要由激活的巨噬細胞和單核細胞產(chǎn)生,能夠引起廣泛的細胞反應,包括淋巴細胞的激活與遷移,發(fā)熱與炎癥反應,細胞增殖、分化和凋亡等[1]。人TNF-α包括相對分子質(zhì)量分別為26×103的膜結(jié)合型和17×103的可溶性2種形式,可溶性TNF-α
【相似文獻】
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1 蔣清;胡懿惷;魏利成;;腫瘤壞死因子α在肢體缺血再灌注損傷軟骨中的表達[J];中國組織工程研究與臨床康復;2010年20期
2 徐春曉;人腫瘤壞死因子α的結(jié)構(gòu)和衍生物研究進展[J];國外醫(yī)學.預防.診斷.治療用生物制品分冊;1999年03期
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本文編號:402434
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