寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)屬于黃病毒科黃病毒屬,于1947年在烏干達首次被發(fā)現(xiàn)。根據(jù)系統(tǒng)進化分析,ZIKV可以分為非洲型和亞洲型。雖然ZIKV很早就被發(fā)現(xiàn),但是直到2015年在南美的忽然暴發(fā),并迅速擴散到80個國家后才開始引起人類的關(guān)注。ZIKV主要通過蚊蟲叮咬在人群中傳播,ZIKV的感染可以引起成年人嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥,孕婦感染會導(dǎo)致新生兒先天畸形如小頭癥等,并且ZIKV可以通過血睪屏障對男性睪丸造成損傷。2016年2月,世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)將ZIKV感染列為全球公共衛(wèi)生緊急事件。ZIKV與其他的黃病毒如登革病毒(dengue virus,DENV)、西尼羅河病毒(West Nile virus,WNV)、黃熱病毒(yellow fever virus,YFV)以及日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)等有著同樣的基因組結(jié)構(gòu),均為單股正鏈RNA,在被感染的宿主細胞質(zhì)中,該基因組翻譯出一條長的多蛋白。這個長蛋白后期會繼續(xù)被宿主或者病毒自身的蛋白酶酶切加工成3個結(jié)構(gòu)蛋白[膜蛋白...

【文章頁數(shù)】：163 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 黃病毒文獻綜述
    1.1 黃病毒研究進展
        1.1.1 黃病毒科病毒概述
        1.1.2 黃病毒屬概述
        1.1.3 黃病毒基因組與生命周期
        1.1.4 黃病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1結(jié)構(gòu)與功能
        1.1.5 黃病毒保護性抗體研究
    1.2 寨卡病毒研究進展
        1.2.1 寨卡病毒概述
        1.2.2 寨卡病毒基因組及其整體結(jié)構(gòu)特點
        1.2.3 寨卡病毒致病機理
        1.2.4 寨卡病毒保護性抗體研究
        1.2.5 針對寨卡病毒的抗病毒藥物以及疫苗的研發(fā)
    1.3 寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1研究進展
        1.3.1 寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1概述
        1.3.2 寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1_172-352結(jié)構(gòu)特點
        1.3.3 基于寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1的疫苗和抗體研究進展
第2章 寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1的結(jié)構(gòu)研究
    2.1 前言
    2.2 實驗材料與方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗方法
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 ZIKV NS1表達載體的構(gòu)建
        2.3.2 ZIKV NS1的表達與純化
        2.3.3 ZIKV NS1蛋白晶體的篩選、X射線衍射數(shù)據(jù)的收集以及結(jié)構(gòu)解析
        2.3.4 ZIKV NS1整體結(jié)構(gòu)特點
        2.3.5 ZIKV NS1表面電荷分布特征
        2.3.6 ZIKV NS1序列的保守性與其結(jié)構(gòu)-功能的關(guān)系
        2.3.7 ZIKV NS1參與膜結(jié)合的機制探討
    2.4 小結(jié)與展望
        2.4.1 小結(jié)
        2.4.2 展望
第3章 寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1參與膜結(jié)合及病毒復(fù)制的機制研究
    3.1 前言
    3.2 實驗材料與方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗方法
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 ZIKV NS1突變體蛋白載體構(gòu)建、蛋白表達與純化
        3.3.2 ZIKV NS1及NS1突變體蛋白脂質(zhì)體上浮實驗
        3.3.3 野生型和突變體寨卡病毒在轉(zhuǎn)染細胞內(nèi)的復(fù)制動力學(xué)比較分析
        3.3.4 野生型和突變體寨卡病毒在細胞水平的一步生長曲線
        3.3.5 野生型和突變體寨卡病毒在動物水平的毒力比較
        3.3.6 ZIKV NS1-GGG突變體蛋白結(jié)晶
    3.4 小結(jié)與展望
        3.4.1 小結(jié)
        3.4.2 展望
第4章 寨卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1鼠單克隆抗體的制備與研究
    4.1 前言
    4.2 實驗材料與方法
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗方法
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 ZIKV NS1_172-352以及YFV NS1_172-352蛋白純化
        4.3.2 黃病毒三種NS1蛋白的載體構(gòu)建、表達與純化
        4.3.3 ZIKV NS1鼠單克隆抗體的制備及純化
        4.3.4 ZIKV NS1鼠單克隆抗體相關(guān)特征研究
        4.3.5 抗體輕鏈、重鏈可變區(qū)測序及其胚系基因進化樹分析
        4.3.6 單鏈抗體(scFv)表達載體的構(gòu)建與蛋白純化
        4.3.7 抗體發(fā)揮作用的分子機制研究
    4.4 小結(jié)與展望
        4.4.1 小結(jié)
        4.4.2 展望
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果



本文編號：3985477